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1、酒石酸锑钾对人胃癌细胞体外增殖和凋亡的影响：徐少勇，郭光云，王家宁，黄永章【关键词】胃肿瘤 【Abstract】AIM:Toexplorethetherapeuticeffectsofantimonialsonsolidtumorbyobservingtheeffectsofpotassiumantimonyltartrate（PAT）ontheproliferationandapoptosisofhumangastriccancerSGC7901cellsinvitro.METHODS:MT
2、TmethodeasurethelevelsoftheproliferationofSGC7901cellsintervenedetry.RESULTS:PATinhibitedSGC7901cellgroedependentmanner.PATdisplayedprominentinhibitoryeffectsol/Lat72hours,andthegroatincondensationandnuclearfragmentationicroscopeinthecellsstainedol/L
3、PATat48hours,reaching35.2%.paredonypotassiumtartrate;stomachneoplasms;celldivision;apoptosis 【摘要】目的：通过观察酒石酸锑钾（PAT）在体外对人胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响，探讨重金属锑剂对实体瘤的治疗作用，为PAT用于临床治疗胃癌提供实验依据及理论基础.方法：采用MTT法检测不同浓度PAT对人胃癌SGC7901细胞的生长增殖的影响；应用流式细胞术和Hoechst33258染色后荧光显微镜检
4、测细胞凋亡.结果：5,10,20,40μmol/LPAT能明显抑制胃癌细胞增殖，抑制作用呈时间和剂量依赖性.20,40μmol/LPAT作用72h细胞的生长抑制率分别是54.1%和66.6%；Hoechst33258染色显示PAT作用后，细胞核出现明显的凋亡形态学改变；流式细胞仪检测到凋亡峰，凋亡率以40μmol/L作用48h最大,达35.2%.同时G2/M期细胞明显增多，以对照组的5.4%,增至24.6%.结论：PAT能抑制SGC7901细胞增殖并诱导细胞凋亡. 【关键词】酒石酸锑钾；胃肿瘤
5、；细胞分裂；脱噬作用 0引言 胃癌晚期预后差，长期存活率低［1，2］，5a生存率仅15%~25%［3］.大多数胃癌患者诊断时已到进展期，需接受化疗，但常规化疗药物的效果不理想.因此，寻找新的药物有重要临床意义.最近的研究发现微摩尔浓度的锑剂［酒石酸锑钾（potassiumantimonyltartrate,PAT）、三氧化二锑］能显著抑制白血病细胞、恶性B淋巴细胞生长，而对正常的淋巴细胞无影响，被认为是一个潜在的、有价值的治疗血液系统恶性肿瘤的药物［4-7］.但锑剂对其他实体瘤细胞的作用尚不
6、清楚.我们选用不同浓度的酒石酸锑钾作用于人胃癌SGC7901细胞，观察其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响. 1材料和方法 1.1材料 PAT购自SigmaAdrich公司,用三蒸水配制成1×10-2mol/L储存液.使用时用RPMI1640培养基配成工作浓度;Hoechst33258,PI（碘化丙啶）,RNase购自Sigma公司;四甲基偶氮唑盐(MTT)购自北京华美公司；RPMI1640培养基、小牛血清购自Gibco公司；使用OlympusBX51荧光显微镜∑960酶标仪CoulterEpic
7、sXL流式细胞仪.SGC7901人胃癌细胞株购自中科院上海细胞生物所.用RPMI1640培养液（含100mL/L小牛血清,100ku/L青霉素和链霉素）37℃,50mL/L的CO2孵箱中常规培养. 1.2方法 1.2.1ＭＴＴ法检测细胞增殖取对数生长期细胞用2.5g/L胰蛋白酶消化成单细胞悬液，调整细胞密度为3×107/L，接种于96孔培养板，每孔加200μL的细胞悬液,细胞培养24h贴壁后，加入PAT.设阴性对照组和不同浓度PAT实验组（5,10,20,40μmol/L）.每组均设立4个复
8、孔.培养24,48,72h每孔加入5g/LMTT（PBS配制）20μL再培养4h，吸弃上清，加入DMSO200μL，震荡10min.于酶标仪490nm处测量吸光度A值.上述实验重复3次，取其均值.计算细胞增殖的抑制率=（1-实验组A值）/对照组A值×100%. 1.2.2Hoechst33258染色观察细胞核变化取指数生长期的细胞，以2×109/L密度接种于含消毒盖玻片的6孔板中,培养24h细胞贴壁后加入上述浓度的PAT.24,48h后吸尽培养液，加入固定液(甲醇V∶冰醋酸V＝3∶1)0.5m
