血蓝蛋白对体外培养T细胞影响.doc

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1、血蓝蛋白对体外培养T细胞的影响南华大学刘佳妮1*，陈聪2*，凌晨3，胡皓昀4，曹劲松5#，高勇强6#（1.南华大学医学院2013级临床医学专业4210012016年国家级大学生创新创业训练计划支持项目（NO:201610555010）和2016年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目（NO:2016-283）资助作者简介：刘佳妮，1995-，女，2013级本科生，眼科和耳鼻喉科方向，临床医学专业，南华大学医学院。2.南华大学医学院病原生物研究所4210013.南华大学医学院2014级临床医学专业4210014.南华大学船山学院

2、2015级麻醉学专业4210015.6南华大学医学院病原生物研究所，湖南省特殊病原体防控重点实验室，湖南省分子靶标新药协同创新中心421001出版物名称:ONCOLOGYLETTERS发表时间：2018.02（2018，15:2655-2660）指导老师：高勇强讲师摘要：庆大霉素作为一种广谱抗生素被广泛应用于T细胞体外培养，但初步研究发现庆大霉素对T细胞的活性有显著影响。本研究选择来自凡纳滨对虾的血蓝蛋白作为T细胞体外培养的添加剂。与添加庆大霉素对照组相比，细胞数量无显着性差异，细胞集落形成率随血蓝蛋白浓度的增加而逐渐增加。流式细胞

3、仪检测发现，0.2g/ml血蓝蛋白组（Hem3组)的CD3+CD4+和CD4+CD25+T细胞的分化簇均显著增加。细胞周期分析显示，Hem3组G0/G1期T细胞明显减少，S期T细胞显著升高。MTT分析表明，Hem3组T细胞对HepG2细胞的杀伤作用明显增强。综上所述，本研究认为血蓝蛋白可促进T细胞的增殖和细胞毒性，为血蓝蛋白在T细胞过继免疫治疗中的应用提供了实验依据。Abstract:Asabroad-spectrumantibiotic,gentamicinisusedextensivelyinTcellculturinginvi

4、tro,butpreliminarystudieshaveidentifiedthatTcellactivityissignificantlyaffectedbygentamicin.Inthepresentstudy,thehemocyaninfromLitopenaeusvannameiwasselectedasanadditiveforTcellculturesinvitro.Comparedwiththoseinthecontrolgroup,thecellquantityexhibitednosignificantdiff

5、erence,andtheformationrateofcellcolonyincreasedgraduallywithincreasesinthehemocyaninconcentration.Additionally,flowcytometryassaysidentifiedthatclusterofdifferentiationCD3+CD4+andCD4+CD25+Tcellsinthe0.2µg/mlhemocyaningroup(Hem3group)wereallsignificantlyincreased.Furthe

6、rmore,cellcycleanalysisdemonstratedthatTcellsintheG0/G1phaseweresignificantlydecreasedandcellsintheSphaseweresignificantlyelevatedintheHem3group.Inaddition,MTTanalysisindicatedthatthecytotoxicityofTcellstowardsHepG2cellswassignificantlyincreasedintheHem3group.Takentoge

7、ther,thepresentstudyidentifiedthathemocyaninmayimprovetheproliferationandcytotoxicityofTcells,andtheresultssupportedtheuseofhemocyanininTcelladoptiveimmunotherapy.关键词：血蓝蛋白；T细胞；细胞表型；细胞周期；细胞毒性Keywords:hemocyanin;Tcells;cellphenotype;cellcycle;cytotoxicity1.前言T细胞过继免疫治疗目前较

8、广泛的应用于临床环境中，庆大霉素作为一种广谱抗生素添加剂[1-3]，普遍应用于T细胞体外培养。然而，我们以前的研究显示庆大霉素能够抑制T细胞活性[4]。为此我们选择血蓝蛋白作为T细胞体外培养的添加剂，以维持体外抗菌环境，增强T细胞的活