针剌对大鼠颅脑损伤后Nogo—A表达的实验研究.pdf

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1、2013年10月第3O卷第1O期天津中医药Oct．2013，Vo1．30No．10TianjinJournalofTraditionalChineseMedicine615针剌对大鼠颅脑损伤后Nogo—A表达的实验研究田贵华，王锡友，姚海江2李志刚(1．北京中医药大学东直门医院推拿科，北京100029；2．北京中医药大学针灸推拿学院，北京100029)摘要：[目的】观察Nogo—A在大鼠颅脑损伤后表达变化，探讨针刺干预颅脑损伤后大鼠Nogo—A表达的影响。【方法】雄性sD大鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组、

2、正常对照组，用改良Feeney’s打击法制成大鼠左顶叶局限性脑挫裂伤模型，分别于损伤后6、24、48h和6d组取损伤局部脑组织，采用免疫组化法观察Nogo～A的表达变化并进行统计学分析。【结果]颅脑损伤后，从24h开始，针刺组大鼠脑损伤组织中Nogo—A的表达开始下降。与模型组相比较，针刺组48h、6d的Nogo—A表达均显著降低，差异有统计学意义(P<0．01)。f结论]针刺治疗对大鼠颅脑损伤后Nogo—A表达具有明显的抑制作用，表明针刺对脑损伤大鼠的神经再生具有促进作用。关键词：颅脑损伤；Nogo—A；

3、免疫组化；针刺中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1672—1519(2013)10—0615—03现代医学研究发现，影响颅脑损伤(CCI)后中13mm。电针采用用韩氏(HANS)电针仪，型号为LH一枢神经修复的因素主要包括神经营养因子(NTF)缺402H，由北京大学医学部神经科学研究所监制。乏、轴突生长抑制因子和轴突导向因子等。轴突1．2方法生长抑制因子是目前颅脑损伤研究的热点之一【5J。1．2．1颅脑损伤模型制备参照Feeney等研制的鼠Nogo～A作为轴突生长抑制因子Nogo的异构体之颅脑

4、创伤模具进行改进设计打击装置，对模型组和一，其对轴突再生的抑制作用最强。本实验采用针针刺组大鼠造成左顶叶局限性脑挫裂伤。术前大鼠刺颅脑损伤大鼠督脉上的“百会”、“人中”两穴进行禁食8h，经40％氟烷诱导麻醉后称体质量，然后腹干预治疗，运用免疫组化方法对各组大鼠脑组织轴腔注射浓度为10g／L的戊巴比妥钠(30mg／kg)麻突再生抑制因子nogo—A的蛋白表达含量进行检醉，麻醉成功后俯卧位固定。用8％Na：S清除手术部测，分析针刺对颅脑损伤大鼠损伤脑组织轴突再生位鼠毛并消毒皮肤，正中切开，剥离骨膜，暴露左顶抑制

5、因子nogo—A蛋白表达的影响，从而对针刺治骨，用牙科钻在冠状缝后1．5mm，中线旁2．5mm处疗颅脑损伤的机制进行研究分析。钻一直径5mm骨窗，保持硬膜完整。将撞杆置于硬1材料与方法膜上，用20g砝码置于30cm高处沿外周导管坠1．1材料落，撞击撞杆从而撞击硬膜，造成中度颅脑损伤。按1．1．1实验动物及分组雄性SD大鼠(由中国医神经功能损伤程度评分(NSS)简易准则评估，分值学科学院实验动物中心提供)，180只，体质量250～为4-6者属中度损伤，提示造模成功。打击后切口280g。适应环境3d后进人实验，

6、适应期间采用12h内滴注4万单位硫酸庆大霉素4—5滴，骨蜡封闭骨明／暗周期(早7：00～晚7：0O)照明，自由饮水进食。根窗，缝合头皮。正常对照组不予处理嘲。采用随机数字表法将大鼠随机分为3组，即电针1．2．2行为学观察各组手术后，分别于6h、1d、6d、组、模型对照组、正常对照组，每组60只，然后再将每12d进行行为学观察。参照NSS制定简易评估准则组随机分成6h、1d,6d、12d，4个时间组，每个时间组得分越高，说明颅脑损伤越重。神经损伤伤情共包12只。括10项，提尾时后腿屈曲、不能在地上直线行走、1

7、．1．2针具用华佗牌无菌针灸针，规格为0．30mmX翻正反射(rightingreflex)消失、肢体位置反射(plac—ingreflex)消失、惊吓反射消失、无寻觅行为、俯卧、作者简介：田贵华(1983一)，女，医学博士，主治医师，主要从事不能完全伸直其前肢、木条平衡作业少于60秒(1cnl针剃干预中枢神经系统损伤的机制研究。宽)、不能在4elTl宽木条上行走，每项各1分，共10分。通讯作者：李志刚，E—mail：lizhglq620@163，com。616天津中医药2013年lO月第3O卷第1O期Ti

8、anjinJournalofTraditionalChineseMedicineOct．2013，Vo1．30No．101．2-3治疗方法于造模后即刻以1寸(同身寸，下瘀，有助于瘀血的消散和吸收，更可补神益智，疏通同)毫针针刺“人中”、“百会”两穴，将针柄分别连接脑络。“人中”是手、足阳明经与督脉之会，为危急病至电针仪的电极上，“百会”穴接阴极，“人中”穴接症的常用针刺急救穴位，可明显地促进脑血循环，阳极，持续脉