电针治疗对大鼠脊髓损伤后nogo

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1、电针治疗对大鼠脊髓损伤后Nogo作者:李振鹏,孔抗美,陈育春,郭天明,陈泽锋,刘加贝【摘要】目的:探讨电针治疗对大鼠脊髓损伤(SCI后Nogo_A蛋白表达的影响。方法:以96只2月龄AGINGSYSTEMS软件进行灰度分析,以Nogo_A蛋白和内标蛋白(actin灰度的比值作为Nogo_A蛋白的相对表达量。1.3病理标本制备术后1、7、14和28d时,随机取大鼠每组3只,质量浓度20g/L戊巴比妥钠(40mg/kg腹腔注射麻醉后开胸,自左心室插管至主动脉,剪开右心耳,先灌注PBS150mL,再灌注质量浓度40g/L多聚

2、甲醛250mL,固定。2h后取出以伤段为中心的长约20mm(T8~T10脊髓组织,放入相同固定液继续固定,24h后常规石蜡包埋,连续切片(厚约4μm,分别进行苏木精_伊红及Nogo_A抗体免疫组化染色,观察受损节段组织学改变。1.4免疫组化染色免疫组化染色采用ABC法,切片脱蜡至水,微波修复抗原,滴加封闭液,及抗Nogo_A工作液,室温37℃1d,PBS冲洗,DAB显色,苏木精轻度对比染色,脱水、封固。实验中设立严格的正常血清对照和阴性对照。1.5统计学处理结果以±s表示,分别比较A、B、C组各时间点Nogo_A表达,

3、采用t检验,α≤0.05,SPSS10.0统计软件分析。第3期李振鹏等.电针治疗对大鼠脊髓损伤后Nogo_A蛋白表达的影响2结果2.1苏木精_伊红染色光镜下见B、C组脊髓组织有较多片状出血及出血坏死后形成的囊腔,组织疏松水肿,神经细胞变性,部分神经纤维溶解消失,炎症细胞浸润明显。D组脊髓组织点灶状出血、坏死,范围局限,组织轻度水肿。A组脊髓组织未见出血、坏死及组织水肿、变性等。2.2S,AINEM,etal.Intrinsicversusextrinsicfactorsindeterminingtheregenerat

4、ionofthecentralprocessesofratdorsalrootganglionneurons:theinfluenceofaperipheralnervegraft[J].JpNeurol,1996,370(1:97-104.[4]FOUADK,DIETZV,SCHE.Improvingaxonalgroentalspinalcordinjurybyneutralizingmyelinassociatedinhibitors[J].BrainResRev,2001,36(223:204-212.[5]G

5、RANDPRET,NAKAMURAF,VARTANIANT,etal.IdentificationoftheNogoinhibitorofaxonregenerationasareticulonprotEin[J].Nature,2000,403:439-444.[6]BENOS,HUBERAB,SCHE,etal.Nogo_AisamyelinyassociatedneuriteoutgroonoclonalantibodyIN_1[J].Nature,2000,403(6768:434-439.[8]李晓滨,曾园山

6、,陈玉玲.督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生[J].解剖学报,2006,37(1:30-35.[9]郭家松,曾园山,陈玉玲.督脉电针治疗大鼠全横断性脊髓损伤的实验研究[J].中国针灸,2003,23(6:351-354.[10]陈雅云,曾园山,陈玉玲.电针在脊髓损伤修复中的应用基础研究概况[J].针刺研究,2005,3(2:120-124.

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