荠菜CBF冷诱导途径多价载体的构建和烟草转化.pdf

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1、第32卷第3期上海交通大学学报(农业科学版)Vol_32No．32014年6月JOURNAL0FSHANGHAIJIAOTONGUNIVERsITY(AGRICULTURALSCIENCE)Jun．2014文章编号：1671—9964(2014)03—0033—06DOI：10．3969／J．ISSN．1671—9964．2014．03．006荠菜CBF冷诱导途径多价载体的构建和烟草转化沈忱，周明琦，吴丽华，林娟(复旦大学生命科学学院，遗传工程国家重点实验室植物科学研究所，上海200433)摘要：为了研究荠菜CBF抗冷途径多基因共表达对转基因植株耐寒性的

2、影响，通过同尾酶法将CbCBF、CbICE53、CCI35以及C0R156P进行结合，构建了CbC0R15bP：：CE53+pCaMV35S：：CbCBF+pCaMV35S：：CbRCI35多价植物表达载体并进行了烟草的转化，通过形态观察以及电解质渗透率和相对水含量这两个生理指标的测定显示，转基因植株在4℃和一4℃低温处理情况下，多基因共转化的转基因植株在电解质渗透率和相对水含量与野生型和空载对照之间的差异非常明显，转基因植株在低温下的抗寒冻能力也明显增强，说明CBF途径多基因共转化可以明显提高烟草的抗寒冻能力，此项研究具有一定的实际应用意义。关键词：抗

3、冷；Cb∞R15bP；CbICE53；CbCBF；CCI35；共转化中图分类号：Q78文献标识码：AConstructionofColdInductionPathwayMultivalentVectorinCapsellabursa—pastorisCBFandTransformationofTobaccoSHENChen，ZHOUMing—qi，WULi—hua，LNJuan(SchoolofLifeSciences，FudanUniversity，Shanghai200433，China)Abstract：Toinvestigatetheeffect

4、sofmultiplegeneexpressionofCBFcoldresponsepathwayinCapsellabursa-pastorisonthecoldtoleranceofCO—transgenicplants，wecombinedCbCOR15bP，CblCE53，CbCBFandCbRCI35intoareconstructvectorbyisocaudomers．AftertransferringthepCbCOR15bP：：CblCE53+p35S：：CbCBF+p35S：：CbRCI35vectorintotobacco，weob

5、servedthemorphologiesofthetransgenicplantsandanalyzedtheelectrolyteleakageandrelativewatercontent．Theresultsshowthattwophysiologicalindexesindicatedcold-tolerance．Intransgenicplants，theelectrolyteleakageandrelativewatercontentweresignificantlydifferentwiththewildtypewhentheplants

6、weretreatedatthelowertempreture4℃and一4℃．Theemptyvectortransgenicplants，aftercoldandfreezingtreatments，showedamuchgreatercoldtolerance．ConstructingCO—transformationvectorsbyisocaudomerscanbeaneffectiveandefficientmethodforgeneticbreedingandcropagriculture．Keywords：coldresistance；C

7、bCOR15bP；CblCE53；CbCBF；CbRCI35；CO～transgenic收稿日期：2013—06—15基金项目：上海市基础研究重点项目(09JC1401700)；国家863计划项目(2008AA10Z105)；国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08003—004)作者简介：沈~(1988)，男，硕士生，研究方向：植物生物技术，E-mail：10210700060@fudan．edu．cn；林娟(1962)为本文通讯作者，女，副教授，硕士生导师，研究方向：植物生物技术，E—mail：liNuan@fudan．edu．cn上海交通

8、大学学报(农业科学版)第32卷温度、干旱和高盐等非生物逆境是影响植物生是一个特异