柞蚕微孢子虫Nosema pernyi微管蛋白基因的克隆及系统发育分析.pdf

《柞蚕微孢子虫Nosema pernyi微管蛋白基因的克隆及系统发育分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、应用昆虫学报ChineseJournalofAppliedEntomology2014，51(3)：708—716．DOI：10．7679~．issn．2095—1353．2014．085柞蚕微孢子虫Nosemapernyi微管蛋白基因的克隆及系统发育分析水王勇，黄伶姜义仁文竹于峰石生林秦利(1．沈阳农业大学植物保护学院沈阳110866；2．沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳110866)摘要【目的】柞蚕微粒子病的病原为柞蚕微孢子虫Nosemapernyi，为解明柞蚕微孢子虫微

2、管蛋白基因的序列信息，明确柞蚕微孢子虫的系统分类学地位。【方法】采用RT-PCR、3RACE(RapidamplificationofeDNAends)等技术克隆得到了柞蚕微孢子虫的、和y．微管蛋白基因，并利用a、13-微管蛋白序列，分别采用NJ、ML法构建进化树。【结果】将克隆得到的基因序列提交NCBI(GenBank登录号：KF154086、KF023271、KF740389o构建的系统发育树显示，微孢子虫类以一个独立群位于真菌群体中，与真菌的虫霉门关系较近，且与担子菌、球囊菌、壶菌、接合菌及部分子囊

3、菌互为姐妹群。从部分微孢子虫的系统发育分析结果可以看出，20种微孢子虫分为2个分支，柞蚕微孢子虫与其他Nosema属聚为一类。【结论】本研究克隆得到了柞蚕微孢子虫、和y．微管蛋白基因，系统发育分析为更进一步了解柞蚕微孢子虫奠定了基础。关键词柞蚕微孢子虫，微管蛋白基因，系统发育分析CloningandphylogeneticanalysisofthetubulingenesofNosemapernyiWANGYong，HUANGLing2JIANGYi—Ren2WENZhu2YUFeng'SHISheng．

4、LinQrNLi(1．CollegeofPlantProtection，ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110866，China；2．CollegeofBioscienceandBiotechnology,ShenyangAgriculturalUniversity，LiaoningEngineeringandTechnologyResourceCenterforInsectResource，Shenyang110866，China)Abstract【0bje

5、ctiveslThepurposeofthisprojectwastoinvestigatetubulingenesequencesofNosemapernyiinordertoprovideafoundationforfurtherphylogeneticanalysis．IMethods】UsingRT-PCR，3RACEtechnology,n，andy-tubulingenesofN．pernyiwerecloned．Neighbour—JoiningandMaximumLikelihoodwer

6、eusedtoconstructaphylogenetictree．【Results1，andy-tubulineDNAsequencesofⅣpernyiweresubmittedt0NCBI(GenBankaccessionnumbers：KF154086、KF023271、KF740389)．PhylogeneticanalysisshowsthatthemicrosporidiaareasinglegroupinthefungithataremostcloselyrelatedtotheEntom

7、ophthoromycota，andaresistergroupstotheBasidiomycota，Chytridiomycota，Zygomycota，GlomeromycotaandsomeoftheAscomycota．Ⅳpernyi，togetherwithotherNosemaspp．，belongstooneoftwogroupsinthemicrosporidia_【Conclusion1d，andy-tubulingenesofN．pernyicanbesuccessfullyclon

8、edandtheresultantphylogeneticanalysisprovidesafoundationforfurthertaxonomicresearchonⅣpernyi．KeywordsNosemapernyi，tubulingenes，phylogeneticanalysis资助项目：现代农业产业技术体系建设专项(CARS一22)；沈阳市发改委科研项目(2011154)；沈阳农业大学国家自然科学基金启动基金(