茶多酚EGCG对人骨髓基质干细胞成骨分化基因的影响分析.pdf

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1、第1O卷第7期亚太传统医药Vo1．10NO．72014年4月Asia．PacificTraditionalMedicineApr．2014茶多酚EGCG对人骨髓基质干细胞成骨分化基因的影响分析邓佑芳(麻城市中医医院，湖北麻城438300)摘要：目的：观察并探讨茶多酚EGCG对人骨髓基质干细胞成骨分化基因中有关成分表达的影响。方法：应用浓度为1OM以及1O“M的茶多酚EGCG作用于人骨髓基质干细胞，3周后对比分析相关基因的表达变化，并与DMSO阴性对照，总结茶多酚EGCG对人骨髓基质干细胞成骨分化基因的相关影响。结果：DMSO对照组浓度低于10M的茶多酚EGC

2、G<浓度为10M的茶多酚EGCG。结论：茶多酚EGCG对人骨髓基质干细胞成骨分化基因BMP一2的表达水平有促进作用。关键词：骨质疏松症；茶多酚EGCG；人骨髓基质肝细胞；成骨分化基因中图分类号：R331．2文献标识码：A文章编号：1673—2197(2014)07—0030—01骨质疏松症是骨纤维结构发生退化、骨量减少，进而导黄色液层，将淡黄色液按1：1比例置人生理盐水中，摇匀致患者出现骨脆及骨折等症状，其发病率随患者年龄的增后在培养瓶中进行接种，然后放人37％的环境中，在浓度为加而增高，是严重影响老年人生命质量的病症。相关研究5的CO培养箱中进行培养，两天

3、后初次换液，之后每3发现，茶多酚中的重要成分EGCG对骨细胞凋亡有诱导作天更换1次，当细胞融合至9O时，应用浓度为0．25的胰用，能使骨吸收停止，增加骨密度。笔者对人骨髓基质干细酶进行传代]。胞进行研究，并探讨茶多酚EGCG在其中所起的作用，现报1．2．3茶多酚EGCG在hbMSCs试验中的作用取出道如下。传代至第3代的hbMSCs，将其按密度为1OM接种于含有1资料与方法六孑L的培养板中，将应用浓度为10M以及1OM的茶多酚EGCG作用于人骨髓基质干细胞3周后相关基因的表达变1．1一般资料化与DMSO阴性空白对照后进行对比，细胞融合至9O选用荧光定量PCR

4、试剂盒、胎牛血清、乌龙茶、胰蛋白时，将茶多酚培养液置入其中，设置组别为空白对照组酶RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒以及青一链霉素溶液作为主要试剂，并选用倒置荧光显微镜、CO培养箱、PCR仪(DMSO阴性组)、10M茶多酚组、10M茶多酚组。以及荧光定量PCR仪作为试验的主要仪器。1．2．4对RNA进行提取与逆转录细胞培养21天后，1．2方法应用PBS对细胞进行冲洗，二次后得到提取物hbMSCs，然后对RNA进行提取，应用Trizol提取方法，最后实施逆转1．2．1对乌龙茶中茶多酚进行提取应用定量秤称取录反应。提取菌株，并应用PCR荧光定量分析法制备标准5kg茶

5、叶，将茶叶磨碎后与浓度为60的10OmL乙醇溶液相混合，然后在70％水浴中浸泡30rain，重复此操作步骤3品，观察菌株特异性引物的PCR检测过程中的反应，对产物进行切胶与回收，提取其DNA片段，并将其作为定量的次，将滤液合并，将其真空抽空后再过滤。对乙酸乙酯进行标准品。萃取，然后滤液，3次后将萃取液合并，旋转蒸发仪后使其浓缩，然后在真空冷冻条件下将浓缩所得制剂干燥化，将茶多1．3统计学分析酚提取物取出，最后应用DMSO溶液对茶多酚进行稀释，所选用SPSS17．0软件进行数据分析，采用卡方检验进行得溶液于零下2O℃的环境中保存。计数资料的对比，应用Stude

6、ntt检测方法进行计量资料的对比，最后检测P值，P

7、期亚太传统医药V_o1．10NO．72014年4月Asia，PaciticTradifionalMedicineAPr．2014CO2超临界流体萃取伊贝母中总生物碱工艺研究李新德，骆俊才，骆军玉，殷国勇(1．新疆伊禧堂生物科技有限公司，新疆巩留835400；2．青海湖药业有限公司，青海西宁810001)摘要：目的：采用超临界CO流体萃取法提取伊贝母中的总生物碱。方法：选取萃取压力、萃取温度、萃取时间等参数进行单因素试验，确定各条件对总生物碱萃取率的影响。结果及结论：通过正交试验得到超临界CO萃取伊贝母中总生物碱的最佳萃取正交组合为：ACD，即萃取压力为20M

8、pa，萃取温度为45℃，萃取时间为2h，夹带剂流速为