水产养殖用地衣芽孢杆菌的分离鉴定与其扩增培养基筛选.pdf

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1、贵州农业科学2014，42(7)：98～100GuizhouAgriculturalSciences[文章编号]~OOl一3601(2014)O7—0393—0098—03水产养殖用地衣芽孢杆菌的分离鉴定与其扩增培养基筛选周冬仁，罗毅志，施伟达，叶雪平，沈振伟，汤美锋(浙江省淡水水产研究所，浙江湖州313001)[摘要]为分离筛选适合水产养殖用的地衣芽孢杆菌，并探明不同培养基对其扩增效果，采用微生物学与分子生物学相结合的方法对养殖池塘淤泥中的细菌进行研究。结果表明：分离得到2株抑菌作用最强的菌株DSY002—2011和DSY003-201

2、1，其中，DSY002—2011菌株为地衣芽孢杆菌。由豆粕与红糖、玉米粉、大米粉和麸皮等分别构成的4种生产型培养基均能将DSY002—2011菌株的细菌数扩增至200亿个以上，其中，以红糖2Og／L+豆粕8Og／L的组合最优，其细菌扩增培养浓度可达39×10。cfu／mL。[关键词]地衣芽孢杆菌；分离鉴定；培养基；细菌扩增；水产养殖[中图分类号]$154．3[文献标识码]AIsolationandIdent⋯CatiOnOfBocillus／icheni，()rmfsand0ptimizationoftheCultureMediaZHOU

3、Dongren，LUOYizhi，SHIWeida，YEXueping，SHENZhenwei，TANGMeifeng(ZhejiangInstituteofFreshwaterFisheries，lluzhou，Zhejiang313000，China)Ahstract：ThecombinedmethodsofmicrobiologyandmolecularbiologywereemployedtoisolateandscreenthesuitableB．1icheniformisforaquacultureandexplorethea

4、mplificationeffectsofdifferentculturemedia．Results：TWOstrainsDSY002—2011andDSY003—2011withthestrongestbacteriostaticactionwereisolated，inwhichDSY002—2O11wasB．1icheniformis，thebacteria1countcouldbeuptomorethan20billioninfourproductionmediacomposedofbeanpulp，brownsugar，corn

5、flour，ricemealandbran．Thecombinationofbrowningsugar20g／Landbeanpulp80g／Lwasofthebesteffects，themultiplicationcultureconcentrationofbacteriawasupto39×10。cfu／mL．Keywords：Bacilluslicheniformis；isolationandidentification；culturemedia；bacteriaamplification；aquiculture随着经济迅速发展，

6、人民生活水平得到很大提品药物管理局(FDA)公布了包括地衣芽孢杆菌(B．高，作为优质蛋白源的水产品消耗量逐年增长。集1icheniformis)在内的43种可直接投喂动物的安全约化高密度水产养殖一定程度上解决了养殖面积少菌株；2008年我国农业部公布了《饲料添加剂品种与水产品需求量大的矛盾，但是，经济发展的同时造目录》，其中，微生物添加剂有15种，包括枯草芽孢成的环境污染制约了水产养殖业的发展。由于长时杆菌和地衣芽孢杆菌]。目前，地衣芽孢杆菌作为间高密度养殖带来的养殖水环境恶化，常伴随有害医药和农药开发已经相当成熟，李玉峰等[6。的研究微

7、生物滋生、水产养殖病害严重，给水产养殖业带来表明，地衣芽孢杆菌对马铃薯晚疫病菌、番茄灰霉病很大的危害[1]。如，当养殖水体中溶氧量小于3～和辣椒炭疽病等具有良好抑制作用；地衣芽孢杆菌5mg／L，非离子氨氮含量大于25#g／L时，会影响在水产养殖应用中已取得促进动物生长、减少病害大部分鱼类的健康，造成鳃受伤甚至浮头死亡。因和净化水质等方面的效果，但也存在菌株存放时间此，利用有益微生物制剂调控养殖水质和底质，改善长活力下降、复苏效果不稳定等问题。加之，市场上养殖体的生存环境，抑制有害微生物的滋生，降低发微生态制剂品种较多，且均以休眠状态(芽孢

8、)提供病率，减少抗生素、消毒剂等药物的使用，已成为目给养殖户，直接泼洒到池塘中存在复苏效果差、活菌前解决此类问题并保障水产养殖业健康发展的有效量无法确定的问题]。养殖户若能在使用前将细菌途径之