肉鸡盲肠中芽孢杆菌的分离-筛选与鉴定

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1、2015年第36卷第16期总第493期SILIAOGONGYE肉鸡盲肠中芽孢杆菌的分离、筛选与鉴定1211133■王津马蕊韩烨郭晓倩周志江郑成江范寰（1.天津大学，天津300072；2.天津师范大学生命科学学院，天津300384；3.天津市畜牧兽医研究所，天津300384）摘要：通过形态学研究、革兰氏染色、抑菌试验、耐酸和耐胆盐等方法的测试研究，从健康肉鸡的盲肠中分离、筛选出1株芽孢杆菌。它对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌均有较强抑制作用，且有较强的耐酸和耐胆盐能力，再利用16SrDNA序列同源性比较分析，确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。关键词

2、：肉鸡；盲肠；解淀粉芽孢杆菌；益生素doi:10.13302/j.cnki.fi.2015.16.010中图分类号：Q93文献标识码：A文章编号：1001-991X（2015）16-0045-03Isolation,screeningandidentificationofBacillusfromthececaofbroilerchickensWangJin,MaRui,HanYe,GuoXiaoqian,ZhouZhijiang,ZhengChengjiang,FanHuanAbstract：Throughmorphologicals

3、tudy,Gramstaining,inhibitiontest,acidresistingtestandbilesaltresistingtest,oneBacilluswasisolatedandscreenedfromthececaofthehealthybroilerchickens.IthadstronginhibitioneffectontheEscherichiacoliandSalmonellapullorum,andhadastrongcapaci⁃tyoftoleratedacidandbilesalt.Final

4、ly,itascertainedthatthisstrainwasBacillusamyloliquefaciensby16SrDNAsequencehomologycomparisonanalysis.Keywords：broiler；ceca；Bacillusamyloliquefaciens；probiotic近年来研究发现，由于抗生素过量和不合理的微生态、环境等方面具有十分重要的作用，对家禽消使用导致动物体内药物残留、细菌的耐药性不断增化道疾病（如沙门氏菌、大肠杆菌等细菌性疾病）均有强等问题，给畜禽业及人类健康造成严重危害。抗

5、十分显著的防治作用。生素虽可以抑制病原菌，但对动物体内的益生菌有微生态制剂用于提高动物生产性能和健康水抑制作用，从而破坏了动物肠道内的微生态平衡。平，效果差异较大，原因之一就是菌株定植的宿主特寻找新的替代品以取代抗生素在动物防病及促生长异性。因此，理想的微生态制剂菌株最好来自于同源方面的作用，以减少甚至取代抗生素的应用是目前动物的肠道，只有这样才能增强益生菌功效。本研究的研究热点。目的是从肉鸡盲肠内分离出芽孢杆菌，并围绕菌株的益生素又被称为微生态制剂，是一类能够维持肠形态、抑菌性能、耐酸性和耐胆盐性等几个方面进行内菌群生态平衡，对机体

6、起有益作用的活的微生物制了益生菌株的筛选，为今后开发安全、有效的微生态剂。它可直接通过增强动物对肠内有害微生物的抑制剂奠定基础。制作用或通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，从1材料与方法而促进动物生长或提高饲料转化率。国内外许多研1.1培养基究表明，微生态制剂对平衡动物肠道菌群和改善肠道NB培养基用于培养芽孢杆菌，配方如下：蛋白胨1g、牛肉膏0.3g、氯化钠0.5g、蒸馏水100ml，pH值7.0。作者简介：王津，博士，研究方向为动物肠道微生物菌群。LB培养基用于培养抑菌试验中的指示菌大肠杆通讯作者：范寰，副研究员，硕士生导师。菌和鸡

7、白痢沙门氏菌，配方如下：大豆蛋白胨1g、酵收稿日期：2015-04-03母提取物0.5g、氯化钠1g、蒸馏水100ml，pH值7.0。项目来源：天津市农业科技成果转化项目“绿色食品肉鸡1.2指示菌生产技术集成与示范[201002140]”大肠杆菌（Escherichiacoli）和鸡白痢沙门氏菌45试验研究2015年第36卷第16期总第493期（Salmonellapullorum）由天津市畜牧兽医研究所保存。扩增出鉴定细菌的16SrDNA片段，PCR产物送1.3芽孢杆菌的分离至上海生工生物工程股份有限公司进行纯化和测序用75%酒精消

8、毒鸡体表面，剪断气管和颈动后做Blast分析，并在GenBank（http://www.ncbi.nlm.脉，使鸡迅速死亡。然后用干净的载玻片刮取盲肠nih.gov/blast）中比对，获得鉴定结果。内容物样品0.5g，