木犀草素对人肝癌细胞HepG2的促凋亡作用.pdf

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1、第42卷第5期浙江大学学报(医学版)Vol42No52013生JOURNALOFZHEJIANGUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)2013http：www．journals．zju．edu．cn／medDOI：10．3785／j．issn．1008-9292．2013．05．005木犀草素对人肝癌细胞HepG2的促凋亡作用王远鹏，周亮，龚兴国(浙江大学生命科学学院生物化学所，浙江杭J,I、I310058)[摘要]目的：研究木犀草素(Luteolin)对人肝癌细胞HepG2的生长抑制与促凋亡作用机制。方法：用梯度浓度木犀草素作用于多种肿瘤细胞，以MT

2、T法检测药物对细胞的生长抑制作用，以流式细胞术检测HepG2细胞内活性氧水平，以AnnexinVFITC／PI双染法利用流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况，以Western．blot检测HepG2细胞凋亡相关通路蛋白表达水平。结果：木犀草素对多种肿瘤细胞的生长具有浓度和时间依赖的抑制作用(72h最高抑制率超过60％)，并能有效降低HepG2细胞内活性氧水平(约降低41．11％)。木犀草素作用下HepG2细胞凋亡率可达14．43％左右。木犀草素能够降低HepG2细胞内iASPP蛋白表达水平并上调p53与ASPP2蛋白表达。结论：木犀草素能够抑制肿瘤细胞生长，降低Hep

3、G2细胞内活性氧水平，并调节细胞内相关凋亡通路蛋白水平，从而诱导HepG2细胞凋亡。[关键词]木犀草素；癌，肝细胞；肝肿瘤；细胞凋亡；活性氧；肿瘤抑制蛋白质p53；流式细胞术；肿瘤细胞，培养的[中图分类号]R34[文献标志码]A[文章编号]1008-9292(2013)05—0504—07Pro-apoptoticeffectsofluteolinonhepatomaHepG2cellsWANGYuanpeng，ZHOULiang，GONGXingguo(InstituteofBiochemistry，CollegeofLifeSciences，ZhejiangUni

4、versity，Hangzhou310058，China)lAbstract]Objective：ToinvestigatetheeffectofluteolinoncellgrowthandapoptosisofHepG2cellsnvitro．Methods：CulturedHepG2，HL60，A549andL02cellsweretreatedwithluteolinfordifferentdoses(0ml，2．5ml，10g／mland20g／m1)andvariedtimes(0h，24h，48hand72h)．Cellviabilitywasmeasu

5、redwithMTI"assayandICwascalculated．Thereactiveoxygenspecies(ROS)levelsinHepG2cellstreatedwithluteolinfor6hand12hweremeasuredwithflowcytometry．CellapoptosisofHepG2cellstreatedwithluteolinfor24hwasexaminedwithflowcytometryandAnnexinV—FITC／PI．Expressionlevelsofapoptosispathwayproteins(p53，

6、ASPP2andiASPP)inHepG2cellsweredetectedwithwesternblotandthedoseandtime．effectwasanalyzed．Results：Luteolineffeetivelyinhibitedtumorcellproliferationinadose．andtime—dependentmanner，andtheinhibitionratesof20LLmlLuteolinfor72hwere39．34％，62．90％．57．57％and62．90％toL02，HepG2，HL60andA549cells，res

7、pectively．TheintracellularROSlevelwasdecreasedinHepG2cellsby13．88％and41．11％收稿日期：2012-09．14修回日期：2013-04-01基金项目：国家自然科学基金(30900760)；浙江省科技计划项目(2006C12084)．作者简介：王远鹏(1986一)，男，硕士研究生，主要从事信号传导通路和作用机制研究；E-mail：wangyuanpeng1986@yahoo．con．cn通讯作者：龚兴国(1955一)，男，研究员，主要从事重要药用蛋白和临床诊断用酶的基因工程研究；E-