甲病毒载体构建与应用研究进展.pdf

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1、山东畜牧兽医2014年第35卷文献综述甲病毒载体构建与应用研究进展郭全海赵耀光(商丘职业技术学院动物工程系河南商丘476000)中图分类号：$852．65+2文献标识码：A文章编号：1007．1733(2014)07．0066．03甲病毒载体是近年研究比较热的一种新型载体，对载围广泛、能自我复制以及诱导被感染细胞发生细胞凋亡体的构建、诱导机体的免疫作用机制、构建高效疫苗等等特征。研究人员根据甲病毒的这类生物学特性对甲病方面研究较多，也取得了很大的成果。甲病毒载体的利毒进行了改造，构建出相应甲病毒载体。最初，Dav

2、is等用具有良好的前景，但其安全性和存在的问题还有待进J在野毒VEEV的基因组cDNA的结构蛋白基因中直接插一步研究。入外源基因，进行了融合表达。采用这种方式产生的病甲病毒(Alphavirus)属于披膜病毒科(Togaviridae)，包毒重组子并不稳定，容易产生野生型的病毒粒子，安全括辛德毕斯病毒(Sindbisvirus，SIN)、西门利克森林病毒性不高。人们提出了由辅助质粒提供复制非必需的结构(SemlikiFrostvirus，SFV)、委内瑞拉马脑炎病毒蛋白基因或者直接缺失病毒结构蛋白基因的策略代替直

3、(Venezuelanequineencephalitisvirus，VEE)等3O个成员川。接在甲病毒基因组中直接外源蛋白基因，提高了甲病毒甲病毒可感染众多无脊椎动物和脊椎动物，引起人畜出载体的安全性和稳定性。现发热、皮疹和关节痛等疾病。人们在研究这类由吸血1．2RNA复制子载体Liljestrom等I3】构建了将病毒结构昆虫传播的病毒时，发现该属病毒结构和生活史简单，蛋白基因和非结构蛋白基因分开的SFV表达载体系统，在能在宿主细胞的胞质内大量复制，合成与复制无关的结这一载体系统，非结构蛋白上游为噬菌体SP6或

4、T7聚合酶构蛋白可达细胞总蛋白的25％，并在短时间内诱导细胞凋启动子，病毒的结构基因的编码区被删除但仍含有包装亡。因此利用甲病毒的这类生物学特性进行改造，构建信号(VPs)，以及亚基因组启动子(PSO)。病毒辅助质粒载出相应的甲病毒载体，已被应用于基因治疗和分子生物体含有完整的结构蛋白基因和主要的顺式调控作用元学研究领域。件。这种结构必须在通过SP6或T7RNA聚合酶启动子在1甲病毒载体的构建体外对“全基因组”进行转录和加帽，获得5’端含有帽子结1．1构建机制由于病毒结构蛋白和复制酶是由不同的构的重组RNA，用于

5、体外表达或免疫动物。这种系统以RNA翻译，由亚基因组RNA翻译的结构蛋白并不参与病原核启动子(SP6)启动，表达效率不高，操作也不便。毒的复制过程，因此缺失了结构蛋白的甲病毒基因组1．3DNA．RNA载体Diciommo等【4】将RNA复制子系统RNA与完整病毒基因组RNA一样，具有感染性、宿主范改建成了以DNA为基础的甲病毒载体，又称DNA—RNA系还可以加强与读者之间的联系，从而多渠道、全方位地文化大发展背景下，我国的期刊社应该重视期刊品牌核加快期刊品牌建设。例如美国《财富》杂志社每年会举心竞争力的培养和建设

6、，提升品牌影响力，在激烈的竞办的财富全球论坛；《读者》杂志社经常举办公益活争中取得独特优势。动，号召人们帮助失学儿童、向希望工作捐款、向山区参考文献儿童赠书等，这些活动某种程度上都扩大了《读者》的【l】王小平．发达国家期刊发展模式与品牌战略【J】．当代世界，2009(7)：影响，为自身品牌的宣传造势，提高自身的核心竞争10．13．力。典型的还有《山东畜牧兽医》杂志社参与山东省记【2】宫中亮．打造小众期刊品牌研究tDI．济南：山东大学，2010．协专业报刊工作委员会举办的“抓党建、促脱贫”爱心[3】向枫．论文化大发

7、展下期刊品牌策划新模式的构建册．科技与出报刊，赠阅活动及农村书屋建设等活动，有力地支援了版，2012(8)：42-45．农村文化建设，扩大了影响。《中国水利》杂志社，曾【4]陈相雨，李桂芹．论科技期刊品牌建设中的形象传播【J]．编辑学多次主办了水利专业的高层论坛等学术交流活动，使其报，2010，2O(1)：56．60．影响力不断上升，逐渐成为国际知名的学术杂志。【5】张振华．走出模式：对学术理论期刊打造品牌形象的探索：关于4结语《理论观察》文本的阐释【J】．理论观察，2000(12)．期刊的品牌核心竞争力的提升是

8、一项复杂工程，在(收稿日期：2014-05-05)2014年第7期(总第210文献综述统。这种载体为携带了病毒复制酶基因和外源基因的重主细胞过早凋亡，使得外源基因不能持续表达，不利于组质粒DNA，缺失了病毒结构蛋白基因。它通过RNA聚外源蛋白的转运和免疫细胞对其的加工呈递。Weiss等【H】合酶II依赖性的表达序列启动自我复制的甲病毒载体的用SINV突变株SIN．1在BH