甲病毒载体的研究进展.pdf

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1、2015，49(4)：65～69／龚文芝，等中国兽药杂志·65·甲病毒载体的研究进展龚文芝，刘灿，张东东，宁宜宝(中国兽医药品监察所，北京100081)[收稿日期]2014—12—03[文献标识码]A[文章编号]1002—1280(2015)04—0065—05[中图分类号]$852．659．6[摘要]甲病毒属于披膜病毒科，是一类有包膜的单股正链RNA病毒。近些年来，国内外有关甲病毒载体的研究非常活跃，其已被用于疫苗研究、基因治疗以及分子生物学等研究领域。基于甲病毒载体的构造原理，将其分为三类，分别为复制完全型载体、复制缺陷

2、型载体和DNA／RNA载体。就这三类载体的改造过程进行了探讨，并对这三类载体的特点及其应用研究进展等方面进行了阐述，以期为开发出更安全、更有效的甲病毒载体提供参考。[关键词]甲病毒；复制子载体；高水平表达ReviewonAlphavirus—-basedVectorsGONGWen—zhi，LIUCan，ZHANGDong—dong，NINGYi—bao(ChinaInstituteofVeterinaryDrugControl，Beijing100081，China)Abstract：Alphavirusesbelongt

3、othefamilyofTogaviridae，whichareencapsulatedbyacapsidproteinandpossesssinglestrandplusRNA．Inrecentyears，thedomesticandforeignresearchonalphavirus—basedvectorsisactiveandthealphavirus—basedvectorshavebeenusedforvaccineresearch，genetherapyandmolecularbiologyresearch．

4、Basedonthestructuralprinciple，thealphavirusvectorsareclassifiedintothreemaintypes：replication—competentvector，replication—deficientvectorsandDNA—layeredvector．Inthisreview，thetransformation，characteristicsandapplicationofthreedifferentalphavirus——basedvectorsaredis

5、cussedinordertoprovidereferencesforthedevelopmentofsafer，moreeffectivealphavirus—basedvectors．Keywords：alphaviruses；replicon—basedvectors；high—levelexpression甲病毒(Alphavirus)属于披膜病毒科(Togavirus(Chikungunyavirus，CHIKV)等30个成员。甲病毒family)，是一类有包膜的单股正链RNA病毒，该病基因组5’末端的前2／3部分

6、编码非结构蛋白。称为毒寄主广泛，由吸血昆虫或节肢动物叮咬易感脊椎非结构区，该区共编码4种非结蛋白(nspl～nsp4)，动物而传播，目前已发现包括辛德毕斯病毒(Sindbis而靠近3’末端的后1／3称为结构区，编码数种结构virus，SINV)、塞姆利基森林病毒(Semlikiforestvirus，蛋白，这些结构蛋白由亚基因组mRNA翻译得到，sty)、委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelanequine其包括衣壳蛋白(C)、膜糖蛋白E1、E2、E3以及6Kencephalomyelitisvirus。ⅦEv)和基孔肯雅病

7、毒蛋白等。甲病毒在感染细胞过程中5’末端2／3的作者简介：龚文芝，硕士研究生，从事兽用疫苗研发工作。通讯作者：宁宜宝。E—mail：ningyibao@ivdc．org．CB·66中国兽药杂志2015，49(4)：65—69／龚文芝，等基因组RNA首先翻译，产生RNA复制和转录所需统由两个载体构成，一个表达载体包含病毒RNA要的nsps，然后在nsps的作用下，启动子P启动复制所必需的非结构蛋白病毒基因(nspl-4)和插亚基因组mRNA的转录，鉴于亚基因组mRNA的在甲病毒强亚基因组26S启动子之后的外源基因；沉降系数为2

8、6S，因此该亚基因组的启动子命名为另一个辅助载体只包含重组病毒颗粒的必需结构P。随后经过翻译，在病毒和宿主编码蛋白酶的基因。如衣壳和膜蛋白基因等。联合作用下裂解为衣壳蛋白和膜糖蛋白，这些结构这类载体系统经共转染入宿主细胞完成包装蛋白与病毒基因组RNA装配成核衣壳后以出芽方之后能形成病毒颗粒