绿原酸对缺氧复氧心肌细胞内ankyrin-B的调节作用及其机制.pdf

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1、2O14．30临床心血管病杂志(8)：725—726JournalofClinicalCardiology(China)·725·绿原酸对缺氧复氧心肌细胞内ankyrin—B的调节作用及其机制*贺文凤申阳刘欣曹青洪葵h[摘要]目的：探讨绿原酸对缺氧复氧导致的心肌细胞内锚定蛋白一B(ankyrin-B)下降的调节作用及其机制。方法：培养乳鼠心肌细胞，分为对照组、缺氧复氧组和绿原酸处理组。以流式细胞法检测心肌细胞内活性氧(ROS)的水平，用Western-blot检测心肌细胞内ankyrin-B的表达。结果：缺氧复氧后心肌细胞内ROS水平明显增高，绿原酸预处理能够抑制ROS水平的增高[对照

2、组：(237．6±22．3)；缺氧复氧组：(612．1土25．6)，绿原酸处理组：(375．9土30．1)；P

3、omyocytesunderhypoxiare0xygenatiOnHEWg，。SHENYangL己，XinCAOQingH0NGKui1,2(CardiovascularDepartment，theSecondAffiliatedHospitalofNanchangUniversity；theKeyLaboratoryofMolecularMedicine，Nanchang，330006，China)Correspondingauthor：HoNGkui，E—mail：hongkui88@163．cornAbstractObjective：Toinvestigatetheeffect

4、andthemechanismofchlorogenicacidonthereductionofankyrin-Binducedbyhypoxia／re0xygenationincardiomyocytes．Method：CulturedcardiomyocytesofneonatalSDratshadbeendividedintocontrol，hypoxia／reoxygenation(H／R)andhypoxia／reoxygenation+Chlorogenicacid(H／R+CGA)group．Thelevelofreactiveoxygenspecies(ROS)wasd

5、etectedbyflowcytometryandtheexpres—sionofankyrin—Bincardiomyocyteswasdetectedbywestern-blot．Result：ThelevelofROSwassignificantlyin—creasedbyH／Randtheincreasingwasdecreasedbypretreatmentwithchlorogenicacid[controlgroup：(237．6士22．3)，H／Rgroup：(612．1土25．6)，H／R+CGAgroup：(375．9±30．1)；P

6、sionofankyrin—Bincardiomyocyteswa8significiantlydecreasedbyH／Randwasincreasedbypretreatmentwithchlorogenicacid．Conclusion：ChlorogenicacidwasabletopreventcardiomyocytesinjuryinducedbyH／Rbyregulatingankyrin—B．Keywordsankyrin-B；chlorogenicacid；reactiveoxygenspecies锚定蛋白一B(ankyrin—B)表达于多种组织细1材料与方法胞，对

7、细胞膜蛋白及细胞内蛋白的正确定位有重1．1材料要作用。研究表明，锚定蛋白B功能缺陷导致心绿原酸(Sigma公司)，小鼠抗大鼠锚定蛋白一B单律失常，其水平在衰竭心肌组织中显著下降，并克隆抗体(Abcam公司)，活性氧检测试剂盒(碧云天)。且表达下降与活性氧(ROS)的升高相关口]。绿1．2大鼠原代心肌细胞培养原酸是植物中自然存在的一类异喹啉生物碱类选择出生后1～3d的SD乳鼠，取出心脏去除物质，能够减少细胞内ROS的产生，具有抗氧化心房及周围组织