efp蛋白介导芹菜素抗心肌缺氧复氧损伤保护作用的机制研究

《efp蛋白介导芹菜素抗心肌缺氧复氧损伤保护作用的机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：UDC：学号：406522512582南昌大学硕士研究生学位论文Efp蛋白介导芹菜素抗心肌缺氧/复氧损伤保护作用的机制研究Themechanismofefpmediatingapigeninagainstcardiomyocytesanoxia/reoxygenationinjury蔡鑫之培养单位（院、系）：南昌大学药学院指导教师姓名、职称：何明教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称：药理学论文答辩日期：2015年6月日答辩委员会主席：程晓曙a评阅人：aa2015年6月I学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进

2、行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：蔡鑫之签字日期：2015年6月10日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用

3、影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：蔡鑫之导师签名（手写）：何明签字日期：2015年6月10日签字日期：2015年6月10日Efp蛋白介导芹菜素抗心肌缺氧/复氧损伤保护作用的机制研究论文题目姓名蔡鑫之学号406522512582论文级别博士□硕士院/系/所药学院专业药理学E_mail备注：公开□保密（向校学

4、位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：芹菜素属于黄酮类化合物，广泛存在于多种蔬菜、中药材中。研究发现其具有多种药理学活性，其中发现具有抗心肌缺血再灌注损伤的保护作用但其机制还尚未清楚。本实验采用了H9c2心肌细胞，成功建立H9c2心肌缺氧/复氧（A/R）损伤模型，并利用已经构建成功的efp-siRNA腺病毒，深入探讨芹菜素抗H9c2心肌样细胞缺氧复氧（A/R）损伤的保护作用与雌激素效应环指蛋白（efp）蛋白之间的关系。方法：采用状态良好的H9c2心肌细胞，经常规培养后随机分成五组，每组重复六次：（1）正常对照组(Control)、（2）缺氧/复氧组（A/

5、R）、（3）芹菜素+A/R组(apigenin+A/R)、（4）芹菜素+阴性对照+A/R组(apigenin+NC+A/R)、（5）芹菜素+efp-siRNA+A/R组(apigenin+efp-siRNA+A/R)。采用MTT比色法测定各实验组细胞存活率；采用Westernblotting（免疫印迹）法测定efp蛋白表达水平；采用流式细胞仪测定各实验组细胞的细胞凋亡水平以及细胞内线粒体膜电位（Δψm）稳定性、活性氧（ROS）含量；采用酶联免疫法测定各实验组细胞上清中丙二醛(MDA)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SO

6、D)的活性。结果：在成功建立缺氧复氧损伤模型基础上，H9c2心肌细胞经过芹菜素预处理24h后再经过A/R损伤后，与A/R组相比，H9c2心肌细胞中efp蛋白表达水平明显上调具有显著性差异(P<0.01)；不同浓度芹菜素预处理组与A/R组相比，40μM浓度的芹菜素预处理组中efp蛋白表达量上调最为明显且细胞存活率最高，具有显著性差异(P<0.01)；通过酶联免疫法测定各实验组细胞上清后，与A/R组相比：芹菜素+A/R组MDA含量下降、LDH活性下降，SOD与GSH-Px活性都分别增强，具有显著性差异(P<0.01)；采用流式细胞仪测定各实验组后，与A/R组相比：芹菜素+A

7、/R组细胞凋亡数量减少、线粒体膜电位稳定性增加、细胞内ROS含量明显减少，具有显著性差异(P<0.01)；然而芹菜素+efp-siRNA+A/R组，与芹菜素+A/R组相比芹菜素抗心肌缺氧复氧（A/R）损伤的保护作用却被显著削弱。III摘要结论：芹菜素抗心肌缺氧复氧（A/R）损伤的保护作用至少部分地依赖于efp蛋白表达程度的增加。关键词：芹菜素；雌激素效应环指蛋白；缺氧复氧损伤；心肌保护IVAbstractABSTRACTObjective:Apigeninisthewidelydistributedflavonoidthatexitsin