蛞蝓提取物联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞HCCLM3的凋亡诱导作用.pdf

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1、第31卷第l2期中华中医药学刊V01．31No．122013年12月CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEDec．2013蛞蝓提取物联合5一氟尿嘧啶对肝癌细胞HCCLM3的凋亡诱导作用吴波明，曾芳，黎运呈(1．宁波市第二医院，浙江宁波315010；2．舟山市舟山医院，浙江舟山316004)摘要：目的：探讨蛞蝓提取物(LimaxExtracts，LE)联合5一氟尿嘧啶(5一fluorouracil，5一Fu)对人肝癌细胞株HCCI朋3的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法：以人肝癌细胞株HCCLM3为研究对象

2、，分为正常对照组、LE组、5--Fu组、LE+5一Fu联合组。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTr)比色法检测细胞活性，倒置显微镜下观察细胞凋亡形态学变化，异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白v／碘化丙啶(AnnexinV—FITC／PI)双染流式细胞术定量检测细胞凋亡率，Westernblot法检测凋亡蛋白Caspase一3的活化表达。结果：(1)LE和5一Fu单用或联用组对正常人肝细胞L．-O2未见明显抑制作用，但可抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖并明显诱导其凋亡。(2)LE和联用组作用HCCLM3细胞早期凋亡率比5一Fu组高，而中晚期凋亡及坏死率却相反。(3

3、)联用组在低浓度时具有很好的促凋亡作用，其促凋亡活力优于LE或5一Fu单用组，而且联用时可起到显著减毒增效作用。(4)LE和5一Fu单用或联用均可促进Caspase一3蛋白的活化，具有时间正效应，且LE组和联合组cleavedCaspase一3表达量高于5一Fu组。结论：LE和5一Fu联合或单用均能有效抑制HCCLM3细胞增殖，诱导其凋亡，其机制可能与激活Caspase一3表达有关。关键词：蛞蝓提取物；5一氟尿嘧啶；凋亡；增殖；肝癌；Caspase一3中图分类号：a285．5文献标志码：A文章编号：1673—7717(2013)12—2787～0

4、5Ap0ptosis—-inducingEfectsofLimaxExtractsCombinedwith5一fluorouracilonHumanHepatoceUularCarcinomaCellLineHCCLM3WUBoming，ZENGFang，LIYuncheng(1．TheSecondHospitalofNingboCity，Ningb0315010，Zhejiang，China；2．ZhoushanHospital，Zhoushan316004，Zhejiang，China)Abstract：0蜘ctive：Toinvestiga

5、tetheeffectsofLimaxExtracts(LE)combinedwith5一fluorouracil(5一Fu)inin—hibitingproliferationandinducingapoptosisandthemechanisminhumanhepatocellularcarcinomacelllineHCCLM3．Method：HumanhepatocellularcarcinomacelllineHCCLM3wereculturedanddividedintoLEgroup．5一Fugroup．LE+5一Fugroupan

6、dcontrolgroup．AnMTTassay，Invertedmicroscope，AnnexinV～FITC／PIstainingandWesternblotwereappliedtoidentifytheviabilityofcells，observingcellmorphologyandstagesofapoptosis，anddetectingapoptosis—relatedsignalingproteinCaspase一3respectively．Results：(1)LEand5～Fueithercombinedoralones

7、ignificantlyinhibi—tedproliferationandobviouslyinducedapoptosisinHCCLM3，whileLEorcombinationgrouphadnosignificantinhibitoryefectsonnormalhuman1iverL一02cells．(2)Therateofmidandlateapoptosisornecrosiswasgreaterin5一FuthanthatofLEorcombinationgroup，buttheearlyapoptoticratewasjust

8、theopposite．(3)Pro—apoptoticactivityofthetwo—drugcombinationwasmuchs