铜绿假单胞菌耐药率与抗菌药物最低抑菌浓度检测的相关分析-论文.pdf

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1、山西医药杂志2013年12月第42卷第12期上半月ShanxiMedJ，December2013，Vo1．42，No．12theFirst·1431··医学检验·铜绿假单胞菌耐药率与抗菌药物最低抑菌浓度检测的相关分析河北省邢台市第三医院(054000)马芳张民峰白现英铜绿假单胞菌(PA)属于革兰阴性杆菌，是常见的条件11孔加药液，每孔1O“L，第12孔不加药作为生长对照，冰致病菌之一，也是重症监护室(ICU)感染常见的病原菌。冻干燥后密封，～2O。C以下保存备用。随着广谱抗生素的广泛应用，多重耐药的PA逐渐增多，给1．4．2接种物制备：将用

2、直接菌悬液法制备的浓度相当临床治疗带来了极大的困难。广泛使用抗生素，多种抗生于0．5麦氏比浊标准的菌悬液，经MH肉汤1：1000稀释素反复使用甚至不合理使用，使PA成为ICU内最常见的后，向每孔中加IO0I，密封后置35C普通空气孵箱中，孵病原菌，且耐药性显著高于普通病房_1]。本研究回顾性分育16～20h判断结果。此时，第1孑L至第11孔药物浓度分析了我院ICU与普通病房铜绿假单胞菌感染的高危因素别为128、64、32、16、8、4、2、1、0．5、0．25、0．125#g／mI。及耐药性，为临床预防及治疗PA感染提供参考。1．4．3结果

3、判断：以在小孔内完全抑制细菌生长的最低1资料与方法药物浓度为MIC，当在微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时，1．1菌株来源记录抑制细菌生长的最高药物浓度。如出现多处跳孑L，则2012年1月至1O月我院临床各科室送检的标本465不应报告结果，重复试验。份，包括痰液、尿液、咽拭子、脓性分泌物等标本。排除同一1．4．4细菌形态学观察：在0．5MIC各抗菌药物培养不同患者相同部位重复菌株。采用常规方法将各临床送检标本时间的细菌肉汤中，取1mL加到EP管中，放入低温离心于35℃孵育18~24h，获纯待检菌落，之后采用法国生物机中，4℃，3000r／rai

4、n，离心1Orain。离心完毕，取出EP梅里埃(API)公司生产的VITEK232全自动细菌鉴定系统管，弃去上清，加0．1mI0．9氯化钠注射液清洗，再人低进行菌株鉴定(操作按使用说明书进行)。所有菌株的生化温离心机，4℃，3000r／min，离心10min。离心完毕，弃去试验符合PA的标准，质量控制菌株PA为ATCc27853。上清，取沉淀涂片。待样品干燥后，进行革兰染色，光镜下1．2抗菌药物观察细菌形态变化。哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星、亚胺培南、1．4．5抗菌药物的MIC检测：采用微量肉汤稀释法测定头孢哌酮／舒巴坦、美罗培南

5、、环丙沙星。MIC，根据所测每株菌MIC值，计算MICs。与MIC。。1．3药敏试验2结果采用K—B法，按临床实验室标准化协会(CLSI)标准判465例PA的药敏结果：头孢哌酮／舒巴坦耐药率断结果。48．82，哌拉西林／他唑巴坦耐药率51．5O，头孢他啶耐药1．4抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的测定率23．43，亚胺培南耐药率47．18，美罗培南耐药率1．4．1MIC板制备：无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的51．32，阿米卡星耐药率43．51，环丙沙星耐药率抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯乙烯板中，第1～48．12。ICU与普通病房PA

6、对7种抗生素的MIC见表1。表1ICU与普通病房铜绿假单胞菌对7种抗生素的最低抑菌浓度t~g／mL抗菌药物ICU普通病房MIC范围MIC5oMIC90MIC范围MICsoMICgo头孢他啶1～6432640．25～643264亚胺培南2～128641280．125～1283264美罗培南1～128641280．25～1283264环丙沙星2～128≥128≥1280．5～128128≥128头孢哌酮／舒巴坦钠4～128≥128≥1280．25～l28l28≥128哌拉西林／他唑巴坦2～128128≥1280．25～12864l28阿米卡星1

7、～128641280．25～128641283讨论为头孢他啶，其中多重耐药的PA呈上升趋势。PA膜的特近年来，PA耐药率有上升趋势_2。]，PA分布广泛，是异性孔蛋白有OprC、OprD、OprE、OprF、OprG和OprH。健康人皮肤、黏膜、呼吸道和消化道中常见的定植菌，也是其中OprC、OprD、OprE可以让一部分相对分子质量较小医院感染最常见的病原菌之一。本组资料显示PA对7种的亲水性的碳青霉烯类抗生素通过。文献[4]指出，亚胺培抗菌药物的平均耐药率为44．84，并呈现多重耐药特点，南经外膜蛋白OprD2的特异通道进入PA菌体内，

8、也就是对抗菌药物耐药率有逐年上升的趋势，耐药率较低的药物说OprD2缺失或突变可能导致PA对亚胺培南的耐药。·1432·山西医药杂志2013年12月第42卷第12期上半月Shan