同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响.pdf

《同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第44卷第9期温州医科大学学报VO1．44No．92014年9月JournalofWenzhouMedicalUniversitySep．2014●●同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL．1I3、IL．6表达的影响毛瑞阳，王川怡，杜晓红(温州医科大学附属第一医院老年科，浙江温州325015)[摘要]目的：研究同型半胱氨酸(HCY)对神经小胶质细胞(bv一2细胞)白介素．1B(IL．1p)、白介素．6(IL．6)表达的影响。方法：在细胞培养液中加入HcY、半胱氨酸(DL—cY)、空白对照组及溶剂对照组干预后，用细胞计数试剂盒(CCK8法)观察各组细胞增殖活性，并用酶联免疫吸附测定(ELISA)

2、法测定细胞培养上清液IL—l§、IL．6浓度，用实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)的方法评价IL．10、IL．6mRNA表达改变。结果：实验各组中细胞增殖活性差异均无统计学意义(尸>0．O1)，而HCY组IL-1p、IL．6的mRNA表达及上清液中蛋白表达与其他各组相比均有显著增加(P<0．01)。结论：HCY上调神经小胶质细胞IL．ip、IL．6的表达。[关键词]神经小胶质细胞；同型半胱氨酸；白介素一ip；白介素．6[中图分类号]R322．8[文献标志码]A[文章编号]1000—2138(2014)09—0664-03EffectsofhomocysteineOilexpress

3、ionofIL-lp．IL-6ingittercellsMAORuiyang,WANGChuanyi,DXiaohong．DepartmentofGeriatrics,theFirstAfiliatedHospitalofWenzhouMedicalUniversity,Wenzhou,325015墨匝田Objective：Toinvestigatetheefectofhomocysteineontheexpressionofinterleukin．113(IL．1D，interleukin-6(IL一6)ingittercells．Methods：TheBV-2cellswerecul

4、turedinthecellculturefluidfor24hours．HCY／DL—CYorthecontrolsolventwereadded．andacellcountingkit(CCK8)wasusedtoobservetheproliferationactivity．Enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)wasusedtoevaluatetheconcentrationofIL-113andIL一6inthecellculturesupemate．Well，mRNAlevelsofIL-1BandIL一6wereanalysedbyRea

5、l-timeQuantitativePCRDetectingSystem(QPCR)．Results：Theproliferationactivityineachgroupwerenotsignifi—cantlydiferent，andthemRNAexpressionandproteinexpressionofIL-1BandIL·6inthesupernatanthomo-cysteinegroupwassignificantlychanged．Conclusion：HomocysteineincreasestheexpressionofIL-1D，IL·6ingittercell

6、s．gittercells；homocysteine；IL·-113；IL-6同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)是目前临1材料和方法床研究的一个热点，大量的研究表明，HCY是动脉粥样硬化的一个独立危险因素，高HCY血症与脑梗死1．1材料神经小胶质细胞株(by一2细胞)购自密切相关，同时有研究显示HCY还是一种炎症刺激中国医学科学院协和医科大学基础医学细胞中心，物，能诱导炎症、免疫反应共同的转录因子NF．KBDMEM高糖培养基、南美胎牛血清购自hyclon公司，的激活，IL一1p和IL一6是神经小胶质细胞激活后分进口分装IL．1D、IL．6的ELISA试剂盒购自RB公司，泌的

7、主要细胞因子，同时也是炎症激活的常见标志Trizol试剂、PlatinumTaqDNAPolymerase购自物。目前，HCY对神经小胶质细胞活化炎症因子释宝生物生物工程公司，CCK8试剂盒购自同仁化学研放的作用鲜见报道，本研究旨在探讨高HCY水平对究所。神经小胶质细胞释放细胞因子的影响。1．2方法1．2．1细胞培养：含体积分数为0．1的胎牛血清的DMEM高糖培养基置37℃、体积分数为0．05的co的收稿日期：2013-08—19培