脑啡肽对大鼠海马神经细胞IL-6基因表达的影响.pdf

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1、第8卷第2期中国组织化学与细胞化学杂志Vol.8.No.21999年6月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYTOCHEMISTRYJun.1999脑啡肽对大鼠海马神经细胞*IL-6基因表达的影响1高娜王阿敬杨渝珍邹飞胡谋先(同济医科大学实验医学研究中心武汉430030)摘要本文研究了大鼠海马内微量注射甲硫-脑啡肽(M-ENK)对海马细胞的白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)基因表达的影响。大鼠双侧海马内微量注射细菌内毒素脂多糖各1μl(LPS,浓度:50ng/ml),于90min后用原位

2、杂交技术检测到海马结构IL-6的基因表达,以齿状回颗粒细胞层显著。当海马内预先注射M-ENK(每侧1μl,浓度:10μg/μl),30min后再给予脂多糖则未见IL-6基因表达。结果表明M-ENK及LPS可影响脑内IL-6的基因表达,在中枢调节机体免疫功能中,IL-6可能具有重要作用。关键词甲硫-脑啡肽海马IL-6基因表达大鼠THEEFFECTOFENKEPHALINONINTERLEUKIN-6GENE*EXPRESSIONINHIPPCAMPUSNEURONSOFRAT11GaoNa,WangAjing,YangYuzhenetal(

3、Dept.ofPhysiology,capitalMedicalUniversity,Beijing,1000541ResearchCenterforExperimantalMedicine,TongjiMedicalUniversity,Wuhan,430030China)Theeffectofintrahippocampalmicroinjectionofenkephalinoninterleukin-6(IL-6)geneexpressioninhippocampusneuronsofratwasstudiedusinginsitu

4、hybridizationmethod.TheIL-6geneexpressionwasdetectedindentategyrusofhippocampus90minaftermicroin-jecting1μloflipopolysaccharide(LPS,50ng/μl)intobilateralhippocampus.Theexpres-sionofIL-tmRNAinducedbyLPSwaslocatedingranulecellsofthedentategyrus.TheLPS-inducedIL-6geneexpress

5、ioningranulecelllayerwasinhibitedbypre-injecting1μlofMet-enkephalin(M-ENK,10μg/μl)intobilateralhippocampus.TheresultssuggestthatM-ENKandLPScaninfluenceIL-6geneexpressioninthehippocampusandIL-6mightplayanimportantroleincentralneuroimmunomodulation.KeyWordsMet-enkephalin;Hi

6、ppocampus;IL-6geneexpression;Rat随着神经免疫调节学科的发展,细胞因子在其中的作用也愈来愈受到重视。其中,IL-1在[1,2,3]中枢神经系统中的分布、基因表达及功能作用等的研究已取得相当进展。近来,IL-6在中枢神经系统内的基因表达状况及其功能也成为一个引人注目的研究领域,有报道中枢内*国家自然科学基金资助课题(No.39330201,39270250)1现在地址:首都医科大学生理教研室北京100054128中国组织化学与细胞化学杂志第8卷[4,5]IL-6可通过下丘脑-垂体-肾上腺轴及下丘脑-垂体-胸腺轴

7、对免疫功能产生抑制性影响。在神经-免疫调控中,海马结构对机体免疫功能的调节具有重要作用,损毁后可使免疫功能增[6,7,8]强。我们以前的工作曾证实海马内微注射脑啡肽可增强机体细胞免疫功能并抑制脑内[9]IL-1的基因表达,本文拟探讨海马内脑啡肽在调节机体免疫功能中,除IL-1外是否还有IL-6的参与?为此应用IL-6探针检测了LPS及M-ENK对海马神经细胞IL-6mRNA表达的影响,以证实海马内脑啡肽调节免疫功能中IL-1及IL-6所起的作用。材料和方法1动物Wistar大鼠18只,雌雄不拘,体重200g左右,由同济医大实验动物中心提供

8、。2试剂与材料含IL-6cDNA片段的质粒及宿主菌由同济医大免疫教研室惠赠。M-ENK,LPS为Sigma产品。狄高辛DNA标记及检测试剂盒为BoehringerMannheim产品。总RNA

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