全基因组表达谱分析七氟烷麻醉对大鼠海马基因表达的影响

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1、全基因组表达谱分析七氟烷麻醉对大鼠海马基因表达的影响潘志强鲁显福杨俊霞张励才曹君利徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,221002江苏徐州目的：采用大鼠全基因组表达谱芯片结合RT-PCR定量验证，分析七氟烷麻醉下大鼠海马基因表达变化。方法：用2.5%七氟烷麻醉6周龄SPF级SD雄性大鼠(n=6)4小时，（对照组为同周龄未麻醉SPF级雄性大鼠)；48小时后取材，然后抽提海马总RNA(用Invitrogen的TRIzol法提取)。经液氮研磨、氯仿抽提、异丙醇沉淀、30ul溶水后，采用Nanodrop检测样本总RNA浓度及凝胶电泳检测，实验样

2、本总RNA提取质检合格后，用于基因表达谱分析，并用RT-PCR定量验证其全基因组表达谱差异分析结果的准确性。结果：同对照组(未麻醉SPF级SD雄性大鼠)相比，417个基因(包括67个上调基因和350个下调基因)出现了明显差异表达(＞2.0或＜-2.0倍，P＜0.05)。这些差异表达基因中，有45个已知名称基因与细胞代谢、机体发育、生物合成、生命相关物质结合、定位、信号转导和通讯有关。为验证基因芯片分析结果，我们随机抽取6个差异基因来验证该结果；我们还选取了7个表达差异较大基因，包括3个上调基因(RMCP-1,Slc6a3,和Pitx2

3、)和4个下调基因(VN7,AVP,IP10和OT)，来调查基因表达差异是否有药物剂量。结果表明基因芯片表达谱结果准确可靠；且基因表达变化没有明显的药物剂量依赖性。结论：七氟烷作为一种广泛用于临床的吸入性麻醉剂，越来越多证据提示，七氟烷因能改变大鼠海马基因表达导致学习基因损伤。然而，七氟烷诱导海马全基因组表达变化仍知之甚少。本研究中，我们通过全基因组表达谱芯片分析了大鼠海马基因表达变化。得出如下结论：SD雄性大鼠经七氟烷麻醉4小时，能够诱导海马较多基因表达的长期变化(至少2天)，这些差异性表达变化可能与学习记忆受损的细胞机制或吸入麻醉药

4、麻醉后的其他神经生物学功能紊乱有一定关系。通讯地址：江苏省徐州市淮海西路84号江苏省麻醉学重点实验室电话：0516-85582561E-mail:zhiqiangp2002@yahoo.com.cn