微波辐照对大鼠海马coxi、iv基因表达影响的论文

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1、微波辐照对大鼠海马COXI、IV基因表达影响的论文【关键词】微波;海马;细胞色素c氧化酶;能量代谢  摘要:目的研究微波辐照后大鼠海马组织细胞色素c氧化酶(cox)亚基i、ivmrna表达变化和对酶活性的影响,探讨微波辐照对大鼠海马能量代谢影响的机制。方法采用rt-pcr法检测微波辐照后海马组织coxi、ivmrna水平,采用还原细胞色素c法和高效液相色谱法(hpic)分别检测微波辐照后海马组织细胞色素c氧化酶活性和三磷酸腺苷(atp)、二磷酸腺苷(adp)、一磷酸腺苷(amp)含量。结果微波辐照后,大鼠海马组织细胞色素c

2、氧化酶活性和atp含量明显降低,并与coxi、ivmrna表达变化呈一致性。结论微波辐照可影响大鼠海马coxi、ivmrna表达而降低酶的活性,进而引起能量代谢障碍。  关键词:微波;海马;细胞色素c氧化酶;能量代谢  effectofmicrornaexpressioninhippocampusofrats  yujianhua,zhongmin,xieyan,etal.  departmentofoccupationalhygiene,thethirdmilitarymedicaluniversity(chongqin

3、g400038,china)  abstract:objectivetostudymrnaexpressionofcytochromecoxidase(cox)subunitⅰ,ⅳandactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusofratsaftermicroolecularmechanismofmicroetabolismdeficitinhippocampusofrats.methodstheexpressionofcytochromecoxidasesubunitⅰandⅳmr

4、naaftermicroonophosphate(amp)andactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusanceliquidchromatography(hplc)andreducedcytochromecmethodsrespectively.resultsdecreasedactivityofcytochromecoxidaseandcontentofatpinhippocampusecoxidasesubunitⅰandⅳmrnaicrornaandavtivityofcox

5、,andfurthertoinduceenergymetabolismdeficitinhippocampusofrats.  keyicropus;cytochromecoxidase;energymetabolism  现代生活与微波技术的应用密切相关,由此导致的环境污染问题已引起了广泛关注。.本研究选择在细胞色素c氧化酶(cox)活性中起主要作用的催化亚基ⅰ和调节亚基ⅳ为观察指标,观察微波对cox活性和基因表达的影响,以期探讨微波辐照致大鼠海马能量代谢改变的分子机制。  1材料与方法  11材料(1)实验动物:健康雄

6、性j公司);凝胶成像系统(美国bio-rad公司);du640紫外分光光度计(德国beckman公司);高效液相色谱仪(日本岛津公司)。(4)试剂:coxi引物(上游:5′gctgctaatactggcagtgaga3′,下游:5′gcttcggaaactgacttgtacc3′,扩增片段约381bp);coxiv引物(上游:5′ggcagcagtggcagaatgttgg3′,下游:5′acaagcgcagtgaagccgatga3′,扩增片段约364bp);内参βactin(上游:5′taaagacctctatgcca

7、acacagt3′,下游:5′cacgatggaggggccggactcatc3′,扩增片段约241bp),所有引物由上海sangon公司合成。atpna2、adpna2、cytc(美国sigma公司)。  12方法  121动物辐照动物置于可透谢微波的专用辐照盒内,在反射近似零的辐照暗室接受全身一次性辐照20min,辐照环境温度和湿度用设备保持恒定,温度(18±2)℃,湿度50%~70%,对照组除不接受辐照原的作用外其他处理条件与辐照组一样。  1.2.2海马组织腺嘌呤核苷酸测定[1]将大鼠断头处死,冰浴条件下分离海马,

8、准确称重,按20μl/mg组织加入预冷的02mol/l高氰酸匀浆,4℃,18000g离心15min,上清液用1mol/l碳酸钾中和并调ph至65~70,重复离心1次,取上清液作高效液相色谱分析,采用公式ec(energycharge,ec)=(atp+05adp)/(atp+adp+amp)计算能荷。 

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