顺铂通过促进microRNA-214表达抑制肝癌细胞增殖-论文.pdf

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1、2014年9月基础医学与临床September2014第34卷第9期Basic&ClinicalMedicineVo1．34No．9文章编号：1001-6325(2014)09一I199．05研究~g-文顺铂通过促进microRNA一214表达抑制肝癌细胞增殖刘子文，杜永星，由磊，舒红，赵玉沛(中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院基本外科，北京100730)摘要：目的研究顺铂对microRNA．214(miR．214)在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞增殖的分子机制。方法用real—timePCR方法分析miR一214在肝细胞癌组织及细胞系中的表达

2、；利用CCK．8细胞增殖分析法确定顺铂在肝癌细胞系HepG2及Hep3b中的半数致死浓度(IC。)，并用rea1．timePCR和Westernblot方法检测经不同浓度顺铂处理的肝癌细胞HepG2及Hep3b中miR-214及其靶基因一catenin的表达变化；设计拯救实验研究顺铂、miR-214与肝癌细胞增殖的关系。结果miR一214在肝细胞癌组织及细胞系中表达下调(P<0．01)；顺铂处理的肝癌细胞系HepG2、Hep3b内源性miR-214表达水平明显上调(P<0．01)，而其靶基因卢一catenin的表达水平明显下调(P<0．05)。结论顺铂通过

3、调控miR．214介导的一catenin表达发挥抑制肝癌细胞增殖的作用。关键词：miR．214；肝细胞癌；化疗中图分类号：R73-3文献标志码：ACisplatinsuppresseshumanhepatocellularcarcinomacellgrowthviaregulatingmicroRNA--214-·mediated~-cateninaxisLIUZi—wen，DUYong—xing，YOULei，SHUHong，ZHAOYu-pei(Dept．ofGeneralSurgery，PUMCHospital，CAMS＆PUMC，Beijing10

4、0730，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheimpactofcisplatinonmicroRNA一214(miR一214)expressioninhu—manhepatocellularcarcinoma(HCC)celllinesandtoelucidatethemolecularmechanismofcisplatinforHCCchemotherapy．MethodsReal—timePCRwasconductedtodeterminetheexpression1evelofmiR．214inHCCti

5、ssuespecimensandHCCcelllines．TheIC50valueofcisplatinwasdeterminedbothinHepG2andHep3bcelllines．TheexpressionofmiR一214wasevaluatedinHepG2andHep3bcellswithcisplatintreatmentbyusingreal—timePCRandwealsoperformedWesternblotanalysistodetecttheproteinlevelsof13-catenininHCCcellswiththesa

6、metreatmentasdescribedabove．Arescueassaywasconductedbvusingcisplatintreat．mentincombinationwithmiR一214inhibitor(Anti一214)tofurtherinvestigatethecorrelationamongcisplatin．miR一214，andcellgrowth．ResultsmiR一214expressiondepictedasignificantdownregulationinHCCtis—suesandcelllines(P<0．0

7、1)．CisplatintreatmentledtoanaugmentofmiR．214expressioninHepG2andHep3bcells(P<0．01)andresultedinadecreaseofB．cateninproteinlevels，whichwasverifiedasadirecttargetofmiR一214inHCCcells(P<0．05)．ConclusionsCisplatinrepresentsitssuppressiveefectonHCC收稿日期：2014—06-02修回日期：2014．07．09基金项目：国家自然

8、科学基金(81272767)通信作者(correspondinga