转基因抗矮花叶玉米对雄性大鼠脾脏、胸腺和睾丸组织形态学的影响-论文.pdf

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1、第13卷第2期太原师范学院学报(自然科学版)Vo1．13No．22014年6月JOURNALOFTAIYUANN0RMALUNIVERSITY(NaturalScienceEdition)Jun．2014转基因抗矮花叶玉米对雄性大鼠脾脏、胸腺和睾丸组织形态学的影响阎小艳，张文燕，姚丽娜，郝先辉，刘伟，燕平梅(太原师范学院生物系，山西太原030031)(摘要]为了观察转基因抗矮花叶玉米对雄性大鼠免疫器官脾脏、胸腺组织和生殖器官睾丸组织形态的影响．本实验将80只雄性SD大鼠随机分为4组，即33非转基因玉米组(C1)、33转基因玉米组(M1)、50转基因

2、玉米组(C2)、5O％转基因玉米组(M2)，相应饲料喂养9Od，比较各组雄性大鼠免疫器官和生殖器官形态的改变情况．结果：M1，M2组大鼠脾脏、胸腺和睾丸组织与C1，C2相比，组织的显微结构未见明显的病理变化．结论：用含有33和50的转基因玉米的饲料饲喂大鼠，对其免疫和生殖器官的组织形态学基本没有影响．[关键词]转基因抗矮花叶玉米；免疫；生殖；安全评价[文章编号)1672—2027(2014)02—0088一o5(中图分类号]Q89(文献标识码]A转基因农作物具有抗病虫害能力强、产量高、保鲜期长等优点．但是，由于导人的基因与受体植物原有基因间存在相互

3、作用，使转基因植物有可能出现事先无法预料的特性，这种特性是否会对人类和环境产生效应，即生物安全性问题已经引起了全世界的关注l1]．因此，转基因玉米的食用安全性研究迫在眉睫．开展转基因食品的安全性评价，是保障生物技术在农业和食品领域中可持续发展的重要手段，同时在保障人类健康安全、提供科学决策的依据、促进国际贸易和维护国家权益等方面也有着非常重要的意义]．本实验的目的是以实验动物SD大鼠为实验对象，在日粮中分别添加33％和5O的转基因玉米，进行90d的全食物饲喂实验，旨在观察转基因抗矮花叶玉米对雄性大鼠脾脏、胸腺和睾丸组织形态上的影响，进而进行免疫和生

4、殖毒理学方面的评价．1材料与方法将健康无菌90日龄离乳的SD雄性大鼠8O只，(购至山西医科大学试验动物中心)．随机分成四组，分笼饲养，分别为M1组(含33转基因玉米的饲料)、M2组(含50转基因玉米的饲料)、C1组(含33非转基因玉米的饲料)、C2组(含50非转基因玉米的饲料)，具体配方见表1．饲养管理按大鼠饲养管理的正常程序进行．1．1主要试剂无水乙醇，二甲苯，苏木精，1的伊红，0．01mol／L的PBS缓冲液(pH为7．4)，4的多聚甲醛，0．1mol／L磷酸缓冲液(pH为7．3)，l的盐酸酒精．1．2方法1．2．1组织处理及制片试验第l3周末

5、，每组所有大鼠注射氨基甲酸乙酯麻醉、致死，并打开胸腹腔作大体学解剖．肉眼观察后，立即取出脾脏、胸腺和睾丸组织．将采取的组织块直接放入4多聚甲醛固定，用乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋．将包埋好的组织蜡块，用KD-202C转轮式切片机切成5／zm切片，经6o℃烤片1h[4]．收稿日期：20i3—10-15基金项目：山西省回国留学人员科研资助项目(2012—079)；山西省科技攻关项目(2012031lO08—2)；山西省科技厅青年科技研究基金(2011021030—1)；山西省软科学项目(201304108403)；太原师范学院教改项目．作者简介：

6、阎小艳(1990)，女，山西孝义人，博士，太原师范学院生物系副教授，主要从事动物环境毒理学的研究．第2期阎小艳等：转基因抗矮花叶玉米对雄性大鼠脾脏、胸腺和睾九组织形态学的影响89新购载玻片经去污粉充分洗涤置干，放入硫酸重铬酸钾洗液中浸泡过夜，自来水充分冲洗，再经去离子水冲洗2次，于无水乙醇中浸泡过夜，纱布擦净，60℃烘干lh．表1大鼠饲料配方C1组(饲料I)C2组(饲料II)M1组(饲料I11)M2组(饲料Ⅳ)E转基因玉米O．33O．5转基因玉米O．33O．5面粉O．160．04O．160．04麸皮O．180．O9O．180．O9豆泊O．16O．2

7、O．16O．2鱼粉O．1O．1O．1O．1酵母O．0350．O350．0350．O35磷酸二氢钙O．O2O．020．O2O．O2石粉O．O1O．O1O．O10．0l加碘盐0．0050．005O．0O50．005合计111l1．2．2常规HE染色观察石蜡切片经烤片后做常规HE染色[5]．具体流程如下：切片经二甲苯I、Ⅱ脱蜡，各15min一二甲苯+无水酒精(1：1)lmin一无水酒精I、Ⅱ、95酒精I、lJ和90酒精各5min一8O、709，6、50酒精和蒸馏水各2min一苏木精染色3min一1盐酸酒精分色2min一自来水蓝化5min后，蒸馏水稍洗一5

8、0％、70、80％和90酒精各2min一伊红染液10sec---~95酒精l、II、Ⅲ、无水酒精I和Ⅱ各2min---~Z