氟染毒雄性大鼠睾丸组织对某些生化指标的影响.pdf

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1、毒理学杂志2014年4月第28卷第2期JToxicolApril2014Vo1．28No．2中图分类号：R944．6文献标识码：A文章编号：1002—3127(2014)02—0139—03·实验研究·氟染毒雄性大鼠睾丸组织对某些生化指标的影响张筱文，张珂，许飞华，马军建，王俊玲(兰州大学公共卫生学院，甘肃兰州730000)【摘要】目的探讨慢性氟中毒对雄性大鼠睾丸组织某些生化指标水平的影响，为氟的生殖毒性研究提供实验依据。方法健康雄性Wistar大鼠32只，体重150—180g，随机分为4组：对照组、低、中和高氟组[100、200和300mg／(kg·d)NaF]，灌胃染毒9

2、0d，每天称体重。染毒结束后处死大鼠，摘取睾丸组织，称重并计算脏器系数；分光光度法检测睾丸组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及一氧化氮合酶(NOS)的活性和丙二醛(MDA)、过氧化氢(HO：)及一氧化氮(NO)的含量。结果染氟第3O天大鼠体重组间比较，差异有统计学意义(P<0．05)，其中低、中氟组高于高氟组(P<0．05)；第0、60和90天大鼠体重组间比较，差异无统计学意义(P>0．05)。与对照组比较，各组睾丸组织的SOD和CAT活性无显著性改变(P>0．05)，低氟组MDA、中氟组H：O含量均有显著性升高(P<0．05)，低氟组NOS活性显著性降

3、低(P<0．O1)。结论慢性氟中毒可增强睾丸组织氧化应激效应，损害大鼠生殖系统。【关键词】氟化钠；睾丸；生化指标变化；氧化应激；生殖毒性氟是人体必需的微量元素。研究表明，过量的公司)。超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、氟化物不仅可以损害骨相组织，还可以损害机体多丙二醛(MDA)、过氧化氢(H0)、一氧化氮(NO)及器官系统，其中有关氟对生殖功能影响的报道甚一氧化氮合酶(NOS)检测试剂盒(南京建成生物工程少。。氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡。研究所)。GFU．202原子吸收分光光度计(日本)。电现有资料表明，慢性氟中毒时确有自由基增多和氧子秤(武汉自动化仪

4、器厂)。化应激反应。但截至目前，关于氟致氧化应激水1．3组织匀浆介质的配制将三羟甲基氨基甲烷平改变的研究结果仍互有差异。生殖方面亦是(Tris)1．21g及乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)如此。一氧化氮(NO)作为内源性自由基可与超37．23mg加水500ml，再用200mmol／L盐酸(HC1)在氧负离子自由基反应，作为体内一种重要的信使分pH计监测下调整pH值至7．4，然后加入3．42g蔗糖，子，具有多方面的生物学作用，不同于其他自由基。8g氯化钠(NaC1)，再用蒸馏水补充至1000ml，放人即使在氧化应激反应中，NO的作用也是双重的。因盐水瓶中，高压锅进行消毒，放

5、入4℃冰箱备用。此，作者拟通过动物实验，探讨慢性氟中毒对大鼠睾1．4组织匀浆的制备染毒结束次日，颈椎脱位法处丸组织某些生化指标水平的影响，为氟的生殖毒性死大鼠，快速摘取双侧睾丸，用预冷生理盐水清洗血污研究提供一定依据。后滤纸拭干，称重，去包膜，放入表面皿中眼科剪剪碎，加人匀浆介质(0．01mol／LTris—HCI缓冲液，pH：1材料与方法7．4)，玻璃匀浆器制成10％(m／v)的睾丸组织匀浆，1．1动物及分组健康雄性Wistar大鼠32只，体重低温冷冻离心机3000r／min离心10rain，取上清液150～180g，由兰州大学医学实验动物中心提供(甘动待测。准字14-00

6、06)，按体重随机分为4组，对照组、低氟组、1．5指标的测定每个样品检测2个平行样，严格按中氟组和高氟组，每组8只，分别用生理盐水和100、照试剂盒说明书测定睾丸组织匀浆中的SOD、CAT及200和300rag／(kg·d)氟化钠(NaF)灌胃染毒90d，每NOS活性和MDA、HO及NO含量。天称体重。1．6统计学方法数据处理用SPSS13．0软件，组间1．2主要试剂及仪器NaF(分析纯，上海化学试剂比较采用单因素方差分析，进一步多重比较采用LSD-t检验，检验水准为a=0．05。基金项目：兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(1zujbky-2012·156)作者简介：张

7、筱文，实验师，研究方向：公共卫生学。2结果通讯作者：王俊玲，副教授，研究方向：神经、发育和生殖毒理学。2．1氟对大鼠体重的影响4组大鼠均随着时间延毒理学杂志2014年4月第28卷第2期JToxicolApril2014Vo1．28No．2长，体重增长明显。染氟第30天大鼠体重组间比较，氟组(P<0．05)；第0、60和90天大鼠体重组间比较，差异有统计学意义(P<0．05)，其中低、中氟组高于高差异无统计学意义(P>0．05，表1)。表1氟对雄性大鼠不同观察时间体重的影响(±s，g)注：与对照组比较，P