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1、第36卷5期宁夏医科大学学报2014年5月JournalofNingxiaMedicalUniversity·473·文章编号:1674—6309(2014)05—0473—05·回医药学·失苔刺知丸对脑缺血大鼠再灌注后神经功能缺损及脑组织PI3一K和AKT表达的影响王佩佩,贺晓慧,刘耀龙,刘丽,贾孟辉(1.宁夏医科大学,银川750004;2.陕西延安市中医院,延安716000;3.宁夏银川市第一人民医院,银JiI750001)摘要l目的探讨失苔剌知丸对脑缺血大鼠再灌注后神经功能缺损恢复程度以及皮质缺血周围区磷脂酰肌醇一3一激酶(PI
2、3一K)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)表达的影响。方法169只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金纳多组(阳性药物对照组)和失苔剌知丸组,后3组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2h后再灌注,术后分12h、24h、72h、7d组,共13组,每组l3只。采用ZeaLonga评分法分别观察神经功能缺损恢复程度;TUNEL法检测24h脑细胞凋亡情况;免疫化法观察各组大鼠脑内PI3一K和AKT的表达情况。结果与假手术组比较,模型及各药物组神经功能评分均降低(P<0.05);与模型组比较,各用药组24h、72h和7d神经
3、功能恢复明显,神经功能评分上调,以72h7d点改善尤为明显(P<0.01);失苔剌知丸72h、7d组神经功能评分较金纳多组显著提高(P<0.01)。24h脑细胞凋亡情况显示:失苔剌知丸组在24h组凋亡阳性细胞数明显低于金纳多组和模型组(P<0.01)。与假手术组比较,模型组、各药物组PI3一K和AKT的表达增高(P<0.O1);与模型组比较,各药物组PI3一K和AKT的表达增高(P<0.01);与金纳多组比较,失苔剌知丸组PI3一K和AKT的表达增高,其中24h、72h、7d表达明显(P<0.01)。结论失苔剌知丸可明显改善脑缺血/再
4、灌注损伤大鼠的神经功能,抑制神经细胞凋亡;上调PI3一K和AKT的表达,激活PI3一K/AKT信号通路,可能是其发挥神经保护作用的机制之一。关键词:失苔剌知丸;脑缺血再灌注;PI3一K;AKT;细胞凋亡中图分类号:R29文献标识码:A缺血性脑血管病是临床常见病和多发病。在门”篇,是治疗脑系疾病的经典方剂之一。前期脑缺血再灌注损伤中,缺血核心区主要以不可逆研究发现I4J,:是苔剌知丸治疗脑中风性疾病具的神经细胞坏死为主,缺血半暗带区的神经细胞有确切的疗效。为进一步探求本方治疗缺血性脑在缺血数小时或数天会发生细胞凋亡,且凋亡可血管疾病的作
5、用机制,本课题从细胞凋亡的信号能决定了最终梗死体积。因此,抗凋亡治疗将可通路人手,观察失苔剌知丸对大鼠脑缺血再灌注能成为脑缺血治疗的主要途径,从而发挥神经保损伤后神经功能恢复程度及PI3一K和AKT表达护作用¨J。目前发现许多信号通路通过调控核的影响,以证实失苔剌知丸发挥脑保护的作用机内靶基因的表达,参与缺血再灌注的损伤,其中制可能与激活I’13一K/AKT信号通路有关。PI3一K/AKT信号通路发挥重要的调控作用。1材料与方法失苔剌知丸方出咱《回回药方》残卷十二“众风1.1材料1.1.1实验动物清洁级SD雄性健康大鼠212收稿日期:
6、2013—12—15只,鼠龄3~4个月,体质量(280±20)g,由宁夏基金项目:国家自然科学基金(81260568);“十二五”国家科技支医科大学实验动物中心提供[scxk(宁)2013—撑计划,基层及少数民族地区高发疾病防治适宜技术研究及示范项目(2013BA105B01);“十二五”国家中医药管理局l床重点专科建0001]。设项目——回医药脑病科(1482zj3010mzO01);宁夏自然科学基金1.1.2实验药物组成及制备参考(《回回药(NZ10191);银川市科技攻关课题(2012017)。方》考释)所载“失苔剌知丸”_5原
7、方组成:柴胡作者简介:王佩佩(1986一),女,宁夏人,在读硕士研究生,研究方31g,黑诃子318,芦荟62g,失苔刺知(元胡)6g,菖向:中医药、回医药防治心脑血管疾病的理论和临床研究。蒲6g,番盐6g,少哈木罕苔里(药西瓜)9g,阿里公通信作者:贾孟辉(1962一),男,陕西人,主任医师,硕士研究生导师,研究方向:中医药、回医药防治心脑血管疾病的理论和临床(松蕈)9g,安息香9g,撒额冰(阿魏)9g,干姜9g,研究。荜茇9g,胡椒9g,白芥子9g,芸香9g,巴豆霜3g·474·宁夏医科大学学报36卷(原方记载巴豆用量为9g,因巴豆
8、性猛烈有毒性,按照ZeaLonga的5分制进行,评分1~3分为造所以减至3g)。模成功,剔除评分为0分和4分,经过前期预实验回族医药内服剂型主要以膏剂、丸剂、露剂、模型的制备,模型成活率为80%。散剂为主,考虑动物给药困
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