胃癌 ERCC1基因甲基化的研究.pdf

《胃癌 ERCC1基因甲基化的研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、用癌症杂志2014年4月第2·379·—卷第Thra型』坐!曼!：垒P照：!，：胃癌ERCC1基因甲基化的研究朱瑞杰王红兵【摘要】目的检测胃癌组织、相应癌旁组织及正常胃组织中ERCC1基因甲基化状态。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测ERCC1基因甲基化。结果胃癌组织中ERCC1基因完全甲基化率为46．7％(14／30)，部分甲基化率为30．0％(9／30)，总甲基化率为76．7％(23／30)，显著高于相应的癌旁组织中该基因的甲基化率13．3％(4／30)。10例正常胃组织中该基因未发生甲基化。结论胃癌组织中存

2、在高比例的ERCC1基因甲基化。【关键词】胃癌；核苷酸切除修复交叉互补基因1；甲基化；甲基化特异性聚合酶链反应DOI：10．3969／j．issn．fOOl一5930．2014．04．004中图分类号：R735．2文献标识码：A文章编号：1001-5930(2014)04-0379-02StudyofMethylationofERCC1GeneinGastricCancerZHURuifie，WANGHongbing．XuzhouMedicalCollege，Xuzhou，221002【Abstract】Objective

3、TodetectthemethylationstatusofERCC1geneingastriccancertissues，pairedadjacentcance~OUStissuesandnormalgastrictissues．MethodsMethylation—specificPCR(MSP)wasusedtodetectthemethylationofERCC1gene．ResultsThecompletemethylationrateofERCC1geneingastriccancertissueswas46．

4、7％(14／30)，thepartialmethyla—tionratewas30．0％(9／30)，andthetotalmethylationratewas76．7％(23／30)，whichwassignificantlyhigherthanthemethy—lationrateinadjacentcanceroustissues(13．3％，4／30)．Therewasnomethylationin10casesofnormalgastrictissues．Conclu-sionThereisahighpercen

5、tageofERCC1genemethylationingastriccancertissues．【Keywords】Gastriccancer；ExcisionrepairCROSS—complementinggene1(ERCCI)；Methylation；Methylationspecificpolymerasechainreaction(ThePracticalJourna]ofCa12cer，2014，29：379～380)目前胃癌被认为是1种多基因遗传和表观遗传的过放化疗，每例均有详细的临床资料和手术记录，且均

6、综合性病变⋯。核苷酸切除修复交叉互补基因1(ex．经术后病理检查证实。所有标本均于术后半小时内获cisionrepaircross．complementinggene1，ERCC1)是1得，液氮速冻后一80℃冰箱保存。种重要的DNA修复基因。本研究采用甲基化特异性1．2主要试剂和仪器PCR(MSP)技术检测胃癌ERCC1基因甲基化状态，以主要试剂：基因组DNA提取试剂、EZDNA甲基了解胃癌组织、相应癌旁组织及正常胃组织中ERCC1化试剂盒一Gold、PCR试剂。仪器：PCR仪、紫外分光光基因甲基化水平。度仪。1．3方法1

7、材料与方法1．3．1组织DNA提取和甲基化修饰每个样本取1．1研究对象30mg左右组织块进行匀浆处理，参照组织基因组收集2012年5月一2012年8月徐州医学院附属DNA提取试剂盒说明书提取基因组DNA，UV3000紫医院普外科手术切除的新鲜胃癌组织共30例。相应外分光光度仪测定DNA浓度和纯度，OD∞／OD：。。比值的30例癌旁组织作为对照组，另取1O例胃部良性病在1．8—2．0之间的DNA用于甲基化修饰。各样本变旁正常胃组织也作为对照组。癌旁组织距离癌组织DNA取800ng，参照EZDNA甲基化试剂盒说明书进5am以上

8、。30例患者中男性18例，女性12例，年龄行甲基化修饰，修饰好的DNA洗脱后于一20℃保存。37～77岁，中位年龄53岁。所有病例术前均未接受1．3．2甲基化特异性PCR(methylationspecificPCR，MSP)取修饰好的DNA2Ixl进行MSP反应。作者单位：221002徐州医学院(朱瑞