宫颈癌和胃癌中septin 9基因甲基化的研究

宫颈癌和胃癌中septin 9基因甲基化的研究

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1、R73公开分类号:____________密级:______________UDC:____________单位代码:______________11646硕士学位论文论文题目:宫颈癌和胃癌中septin9基因甲基化的研究学号:_________________________1111075019姓名:_________________________张意琴生物化学与分子生物学专业名称:_________________________医学院学院:_________________________陈辉指导教师:________________

2、_________论文提交日期:2014年4月15日万方数据AThesisSubmittedtoNingboUniversityfortheMaster’sDegreeTheStudyofSeptin9MethylationinCervicalCarcinomaandGastricCancerCandidate:YiqinZhangSupervisors:ChiefpharmacistHuiChenFacultyofMedicalNingboUniversityNingbo315211,ZhejiangP.R.CHINADateApir15,

3、2014万方数据独创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处,本人愿意承担相关法律责任。签名:___________日期:____________关于论文使用授权的声明本人完全了解宁波大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文

4、被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵循此规定)签名:___________导师签名:___________日期:____________万方数据宁波大学硕士学位论文宫颈癌和胃癌中septin9基因甲基化的研究摘要【目的】研究宫颈癌和胃癌中septin9启动子甲基化率,并观察分析SAMe对宫颈癌和胃癌中septin9表达的影响,进而探讨septin9启动子甲基化在宫颈癌和胃癌中的意义以及SAMe诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制。【方法】首先,采用甲基化特异性高分辨率熔解曲线

5、分析(methylationsensitivehighresolutionmeltingcurveanalysis,MS-HRM)技术检测宫颈癌细胞系HeLa、胃癌细胞系MGC以及13例宫颈癌肿瘤组织中septin9启动子甲基化情况;并分析septin9启动子甲基化与宫颈癌肿瘤组织临床病理进程的相关性。其次,通过DAPI荧光核染色法观察由SAMe处理24h、48h后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC的细胞凋亡情况。最后,通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(quantitativereversetranscriptase-polymerase

6、chainreaction,qRT-PCR)方法和MS-HRM技术分别检测由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,vmRNA表达水平以及septin9启动子甲基化程度。【结果】1.发现宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中存在septin9启动子甲基化。2.发现38.5%(5∕13)的宫颈癌组织存在septin9启动子甲基化,但其与宫颈癌的临床分期、淋巴结有无转移、有无脉管内癌栓以及患者年龄这些临床病理参数之间的差异均无统计学差异(P﹥0.05)。3.发现由SAMe处理24、48h后宫颈癌细胞系H

7、eLa和胃癌细胞系MGC出现凋亡。4.与各自的对照组相比,实验组中宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,v的mRNA表达水平明显降低。5.与对照组相比,由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9启动子甲基化程度基本没有变化。I万方数据宫颈癌和胃癌中septin9基因甲基化的研究【结论】本研究发现宫颈癌和胃癌中存在septin9启动子异常甲基化。虽然SAMe并不能使宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9的甲基化位点发生逆转,但在其作用下septin9-v1表达水平降,并且

8、宫颈癌细胞系和胃癌细胞系发生凋亡。表明SAMe可能通过某种途径作用于septin9,导致septin9-v1mRNA表达水平降低,阻碍了JNK信号途径参与细胞增殖的

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