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《维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、..第2卷第期广州医学院学报、勺2.Jn年月〕JJ’F2(〕D以LLLl维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响,“`,黄炜陈涛廖兆全黄济群,,2广州医学院肿瘤生化研究室广州51018;2第一附属医院中心实验室广州510120):p。:提要目的探讨细胞分化诱导剂全反式维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影勺方法月110,、一用1021/L全反式维甲酸处理BE-L7402人肝癌细胞观察细胞碱性磷酸酶(ALP)酪氛酸。酮。:lnlo戊二酸转氨酶(T`r)和羊谷氨酸转肤酶(羊Cl,)活性以及甲胎蛋白(AF)P分泌量结果10ll/L全反式维甲酸使反映肝细胞恶变的指标AFP分泌
2、量和羊GT比活力明显下降(尸<005或<.,。001)ALP比活力和反映肝细胞分化的TAI比活力则明显升高(尸<001或<005)这些酶。学指标与AFP分泌量的变化有助于综合反映肝癌细胞的再分化一;;;。酮戊;丫关键词人肝癌细胞维甲酸碱性磷酸酶酪氨酸二酸转氛酶谷氨酞转肤酶中图分类号R7357丈,1o诱导癌细胞再分化是癌症研究的一个重胞分化最适浓度10ml/LRA进行实验RA,。,要课题维甲酸(又称视黄酸RA)可诱导多先溶于二甲亚矾中然后于细胞培养24h后,,种肿瘤细胞分化并已试用于癌症的防加人培养液至所需浓度对照组则不加RA,.,。。〔’2〕002%治但诱导人
3、肝癌细胞分化的报道很少仅加人二甲亚矾溶剂每组每天各,1990年上海医科大学艾兆伟等人川报道全设三个平行样品实验组和对照组每天换含,。反式维甲酸可诱导SM入4-C7721人肝癌细胞RA或不含RA的培养液连续6天.某些恶性表型逆转,本研究进一步探讨全反13测定方法每天取实验组和对照组各,一3瓶培养液经400印m离心smin后取上清式维甲酸对I3EL7402人肝癌细胞某些表型.,-,、液测定A收集细胞在含05%TirtonX的影响包括对细胞碱性磷酸酶(灯一)酪氨FP..一,s一一、一a了100的O05l/Lp4TirHCI缓冲液中酸酮戊二酸转氨酶(TAI)谷氨酞转肤
4、orn7H,,,“z-Hlmi酶(丫Gl)比活力和甲胎蛋白(AFP)分泌量超声(10n)破碎细胞制成细胞匀,,,浆4℃1000rpm离心smin取上清测定酶活的影响为肝癌细胞分化研究提供进一步的,〕-资料。性及蛋白质含量ALI及丫GT按动力学方,o法测定TAT按Khli等人改良的方法川测1材料与方法,。定蛋白质按助wyr等人的方法阁测定.-11主要试剂RPMI1640培养基为GIB2结果,C(〕公司产品全反式维甲酸为SIG入4A公司.一,21维甲酸对BEL7402细胞产品AFP放免试剂盒由中国原子能科学研碱性磷酸酶究院提供。活性的影响.,一12细胞株及培养条件
5、BEL7402人肝癌结果见表1和图1所示从中可见RA,细胞株由中国科学院上海细胞生物学研究所组ALP比活力逐日升高各处理天数ALP..,,-t提供接种于含10%小牛血清p7H4的RP比活力均显著高于对照组(检验尸<001).,一一一l40培x1052213EL7402细aM16养基中每瓶接种1个细维甲酸对胞酪氨酸酮,。一胞37℃密闭培养选用诱导BEL7402细戊二酸转氨酶活性的影响5,剑少⋯压学院学报(Jz27(3),.结果见表2和图2所示从中可见RAGT比活力均显著低于对照组(尸<001或,,.组工5天。入T比活力逐日上升第达高峰对<005),,照组则第3天
6、达高峰以后逐日下降各处理,,RA组天数RA组TAI比活力均高于对照组第4已比对照组仁图遥注1.,。口óq,lt尸<0,4天起差异非常显著(检验01)表1维甲酸对BEL74倪细胞ALP活性的影响处理时间Al尹比活力(mU/mg蛋白)(天)对照组10产mol/LRA组.40士09150士05<001内勺ù」66士06278士10<001处理时间(天)110士23312士12<001图2R入对肝癌细胞TAT活性的影响320士17753士33<001ú、一6395士35693士30<001~表3维甲酸对BE卜7402细胞了(汀404土28856士15<001活力的影
7、响1〕100处理时间丫GT比活力(mU八g蛋白)ōlOt了dns96230~州.~-拌ILR气组RA组(天)对照组10/-一..-对照组门勺」,1104士1591士10>005皿圈几司V三已1切.120士1075土08>005145土1466土10<001139土0158士30<001卜énùZ125土0342土10<001.114土2845士04<0012345620曰一,一对照组处理时间(天)-闷.-RA组图1RAALp活二~。卜日切对肝癌细胞性的影响妈扭洲之,10表2维甲酸对BE-L7420细胞TA〕活性的影响乙处理时间工、T比活力(mUZmg蛋白)5
8、(天)对照组10拌ULR气组moǎéē
