右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性的影响-论文.pdf

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1、中药药理与临床2014；30(3)137{临《床、2研驴究驴·国》t；t右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性的影响吕苑忠，宾业鸿，罗婕，刘汉锋一(广西医科大学第一临床医学院，南宁530021)摘要目的：观察右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性的影响，探讨广西肝癌的肾虚机制。方法：选择经cT或MRI、An’和肝穿病理确诊的男性中晚期广西肝癌50例，随机分为右归饮组和左归饮组各25例，分别口服右归饮合剂36．67g、左归饮合剂28．33g各50ml，每日三次，连续10个月，比较两组治疗前后主要临床症状及细胞端粒酶活性的变化。结果：右

2、归饮每日110g，服用300天，主要临床症状明显改善、肝癌细胞端粒酶活性显著下降，与本组治疗前比较P<0．01，与左归饮组治疗后比较P<0．O1。结论：右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性具有抑制作用，广西肝癌肾阳虚的机制与端粒酶活性的过度表达密切相关。关键词右归饮；广西肝癌；端粒酶广西是全国乃至全球原发性肝癌的高发热点地区之一，其甘草5g、杜仲20g、肉桂(冲服)5g、制附子(先煎)10g。左归饮：病因和发病机制仍未完全阐明⋯。肝癌患者临床诊断时多为熟地30g、山药15g、山茱萸lOg、枸杞子15g、炙甘草5g、茯苓晚期，即使在发

3、达国家仅有小部分患者适合于肝癌的治愈性治10g。按中药方剂理论严格加工、炮制、配伍，经煎煮水提浓缩配疗(包括肝切除、肝移植、经皮及经动脉消融治疗)。然而，肿瘤制成合剂，入组5O例病人每人每次内服50ml，每日三次，治疗的大小、肝功能的储备能力及门静脉高压等病理因素都限制了10个月。50ml合剂含右归饮36．67g、左归饮28．33g。手术及消融治疗的应用，而且经治愈性治疗后的肝癌患者复发1．2．2治疗前、后50例肝脏穿刺获取标本后液氮保存，以备率仍然很高。肝移植通常用于肝癌早期的治疗，但供体的缺乏检测端粒酶活性。限制了其临床应用。目前，

4、对于不能进行治愈性治疗的肝癌患1．2．3采用TRAP．ELISA技术检测肝癌细胞端粒酶活性者，使用经动脉化疗栓塞(TACE)是唯一提高生存率的方法，但端粒酶提取将液氮保存的肝癌组织冻化后用PBS洗涤2是仅适用于无肝癌临床症状、肝功能良好及门静脉开放的患次，转到1．5mlEpendof管中，加入预冷的端粒酶裂解液100，者。此外，肝癌对化疗药物普遍存在高度的耐药性，对放射治疗混匀后0'E裂解30min，4~C12000rpm离心30min，吸取上清液也不敏感，因此，大多数晚期肝癌患者至今仍没有有效的治疗至新预冷管中。方法。广西肝癌的死亡率

5、已上升到全部死亡原因的第一PCR—TRAP法检测端粒酶重复序列反应体系含20mmol／位，为开辟一条有效防治广西肝癌的新途径，我们采用右归LTfis—HC1(pH8．3)，1mmoVLMgC12，63mmo]／LKC1，0．05r／L饮进行了系统的临床研究。Tween．20，1mmol／LEGTA，50p,mol／LdNTP，T4基因32蛋白1资料与方法1，0．1I~g／mLBSA，Taq酶2U和Ts引物(5'-AATCCGTCGAG—CAGACrIq'~)0．1g，端粒酶提取物6g，加高压去离子水，至终1．1一般资料选择2010年7月

6、～2013年7月经我院确诊体积25ILl，混匀后30℃保温30min，90qC90S灭活端粒酶，加为原发性肝癌中晚期的男性广西籍患者5O例，符合原发性肝癌CX引物(5'-CCCrITACCC1-IIACCcTTAccCTAA-3)0．1，混匀诊断标准。治疗方案经过会诊，均为无手术及肝动脉化疗栓后覆盖石蜡油。在PER扩增仪上扩增31个循环，参数为94℃塞术(transcatheterarterialchemoembolization，TACE)指征或不愿40S，50℃40S，72qC50S，最后72℃延长10min。接受手术及TACE治疗

7、，并取得患者及家属同意接受治疗和随ELISA法定量检测端粒酶活性取PCR产物5加变性液访。Karnofsky评分60分以上，肝功能Child．Pugh分级为A至B201混匀，室温作用10rain，加入杂交液225充分混匀后取出级，预计生存期3个月以上，均有可测量病灶。将患者随机分为100加人MTP包被的微量反应板中，300rpm摇床、37~C孵育右归饮组(n=25)和左归饮组(n=25)。右归饮组平均年龄2h，弃去杂交液，PBS洗3次；向每-：fL2n人抗地高辛过氧化物5O．5岁，左归饮组平均年龄51．2岁。两组病人均有肝区疼痛，腰膝冷

8、痛，畏寒肢冷等主要症状，属中医肾阳虚证。两组问年酶(0．5KU／L)100，室温20min后观察颜色反应，端粒酶阳性龄、主要临床症状积分、肿瘤大小及合并肝硬化、门脉癌栓、远处时液体由无色透明逐渐变蓝，加入终