脓毒症相关性脑病远期脑线粒体损伤与氧化应激的关系.pdf

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1、860·中华实用儿科临床杂志2015年6月第30卷第11期ChinJApplClinPediatr,June2015,Vo1.30,No.11··实验研究·脓毒症相关性脑病远期脑线粒体损伤与氧化应激的关系吕娟娟陈志江郑贵浪王斌陶少华项丹谢关燕刘翠黄锦达曾其毅【摘要】目的探讨脓毒症相关性脑病(SAE)远期脑线粒体损伤与氧化应激的关系。方法通过腹腔注射革兰阴性菌脂多糖(LPS)建立脓毒症模型。出现SAE症状的大鼠(SAE组)及对照组大鼠分别在相应时间点进行神经反射评估后处死,取脑组织提取线粒体。通过

2、流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP)及活性氧(ROS),通过酶标仪检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和一氧化氮(NO)水平。结果神经反射评估在12h已经开始下降,并缓慢恢复。MMP在腹腔注射LPS后明显下降,48h降至最低,差异有统计学意义(F=75.785,P<0.05),72h部分恢复;ROS48h明显升高伴随SOD的明显下降,差异均有统计学意义(F=111.274,21.808,P均<0.05),72h部分恢复;MDA、iNOS和NO48h增加

3、达到峰值,差异均有统计学意义(F=21.955、61.076、21.184,P均<0.05),72h部分恢复。脓毒症大鼠脑组织线粒体SOD活性与MMP呈强正相关关系(r=0.856,P<0.05);脓毒症大鼠脑组织线粒体ROS水平、MDA水平、iNOS活性和NO水平与MMP呈强负相关关系(r=一0.852、一0.890、一0.940、一0.794,P均<0.05)。结论在SAE模型中,脑线粒体损伤的高峰可能发生在48h左右,氧化应激的明显增强可能是导致远期线粒体功能障碍的原因之一。【关键词】脓毒

4、症相关性脑病;线粒体功能障碍;氧化应激;远期损伤Studyoflong—termmitochondrialdysfunctionandoxidativestressinasepsis—associatedencephal0pathymodelMJua~n,ChenZhijiang,ZhengGuilang,WangBin,TaoShaohua,XiangDan,XieMeiyan,LiuCui,HuangJinda,ZengQiyi.DepartmentofPediatrics,Zhujiang

5、Hospital,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510282,ChinaCorrespondingauthor:ngQiyi,Email:zqy_88@163.corn【Abstract】ObjectiveToinvestigatethelong—termmitochondrialdysfunctionandoxidativestressinasepsis—associatedencephalopathy(SAE)mode1.MethodsToinitia

6、teexperimentalsepsis,maleWistarratswereinjectedin—traperitoneallywith10mg/kgoflipop0lysaccharide(LPS)dissolvedinsodiumchloride.Animalswereevaluatedbyneurologicreflexscoresbeforesacrificeandbraintissueswerequicklyremovedattheindicatedtimepoints(0hforc

7、ontrolgroupand12,24,48,72hpostinjectionsforSAEgroups).Cerebralmitochondrialmembranepotential(MMP)andreactiveoxygenspecies(ROS)weredetectedbyflowcytometerandsuperoxidedismutase(SOD),malondialdehyde(MDA),induciblenitricoxidesynthase(iNOS)andnitricoxide

8、(NO)weredeterminedbyusingmicroplatereader.ResultsDeterioratedneurologicalreflexeswerefoundsince12handrecoveredslowly.CerebralMMPin12hSAEgroupwasdecreasedsignificantlycomparedwiththatinthecontrolgroup.MMPwasdecreasedtothelowestlevelat48h(F=75.785,P<0.

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