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《尼可地尔在抑制内皮素诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、..oo第27卷第3期广州医学院学报Vl27N31999·论著·尼可地尔在抑制内皮素诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用`黄韶玲余清声陈华朱柳,(广州医学院广州蛇毒研究所广州510182)、:〕,提要目的探讨丝裂素活化的蛋白激酶(MAIK)在AlP敏感钾通道开放剂尼可地尔抑制。:一’’so内皮素(E-T1)诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用方法将10一10ml几的尼,。可地尔导于培养血管平滑肌细胞E-T1诱导培养大鼠血管平滑肌细胞增殖用WesetmlBot法〕。3。:侧定磷酸化MAIK蛋白表达[H]胸腺喻吮核普酸掺入测定平滑肌细胞DNA合成结果〕飞3ATI敏感钾通道开放
2、剂尼可地尔抑制EI1诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞[H]胸腺喀吮核苍】。:丫fK白A丁P酸掺入并同时剂量依赖性下调M蛋表达结论敏感钾通道开放剂尼可地尔可通过〕。下调MAIK的表达从而抑制E-T1诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增殖;;;;;关键词钾通道开放剂蛋白激酶血管活性物质血管平滑肌培养细胞增殖中图分类号R543、血管平滑肌细胞增殖是动脉粥样硬化关于钾通道开放剂与MAPK生长信号。、由于M〕K再狭窄高血压等多种血管疾病中的主要血系统的关系尚未见有报道AI在,一,i`〕管病变内皮素(ETl)是引进增殖的一个生长信号的传导中的重要作用本研究拟探,主要血管活性物质虽已有多种药物
3、用来抑讨钾通道开放剂尼可地尔(NIC)对内皮素诱,,制血管平滑肌细胞增殖但疗效不佳川因导的血管平滑肌细胞的作用及与妙2和妙4。,M此寻找及开发具有这种作用的抗血管平滑APK表达的关系。肌细胞增殖的药物倍受关注钾通道开放剂1材料和方法可抑制血管平滑肌细胞增殖并影响血管重。,.、,构川钾通道开放后影响了细胞内离子浓11药物和试剂内皮素M19培养基,,APK一度因而与细胞增殖有关的离子信号可能发胰酶磷酸化M抗(兔抗鼠)及辣根过。iSa生改变氧化物标记二抗(羊抗兔)均购自gm公。最近发现的丝裂素活化蛋白激酶司硝酸纤维素膜购自天象人生物制品公,。〕’H(MAIK)是一组位于胞浆的具
4、有丝氨酸和酪司荧光显色增强剂购自杜邦公司[」胸。。氨酸双重磷酸化能力的蛋白激酶川MAPK腺哦陡购自上海原子能研究所.、12血管平滑肌细胞培养5j[取4一6周大可响应G蛋白偶联的受体酪氨酸激酶受体,,,,白鼠颈椎脱臼处死后在无菌条件下取出及离子通道信号而磷酸化磷酸化的MAPK,,,从胞浆移位到细胞核,激活下游与生长相关胸主动脉置于PBS中谨慎去除内外膜将,,中层平滑肌剪成Zmm,小块等距离置于培的转录因子是多种细胞外信号传人核内的,一条共同通路。养瓶中在37℃孵箱(5%(:O:)中贴壁4一6h,,。本课题为广东省科委资助项目N960084:第3期黄韶玲等尼可地尔在抑制内皮素
5、诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用泪彬扭幽牢窿攀园山闪寸哪洲d墓0345,`图2对放射自显影的结果进行光密度扫描定量地显示ET1对大鼠血管平滑肌细胞磷酸化,P4/42入IApK表达的作用以及ATp敏感的钾通道开放剂尼可地尔这种表达的抑制作用..’,’`一7P<0书P<0011对照;2El’-1Inn以/L;3El、110nn洲诵L;4NCI10+EI二1lo,L:/n州.一`o一5·5N10+ET110l/L;6N10+ET1ioolLICnmICnm/.,一23钾通道开放剂尼可地尔对ET1诱导已有的研究表明E-T1诱导细胞增殖的3G蛋白偶的血管平滑肌细胞「H」胸腺嗜咤掺
6、人的抑信号传导途径是通过膜表面的联,。,的受体和肌醇磷脂系统激活制作用在未用尼可地尔的情况下可见PKC随后通过一。E-T1浓度依赖性诱导血管平滑肌细胞DNARasRaf通路激活MAPK活化的MAPK核。’7~s合成尼可地尔10一10mol/L加人培养移位进人核内激活一系生长相关系基因表,一,,。液作用h1后再分别加人ET110~ol/L达引起细胞增殖一,结果发现尼可地尔对ET1诱导的血管平滑近年的研究提示钾通道开放剂是一类肌DNA。细胞合成有明显的浓度依赖性抑制较好的抗血管平滑肌细胞增殖药物钾通道。作1,用(表)开放剂能使细胞膜超极化在某些平滑肌细一,,表1ATP敏感的钾
7、通道开放剂尼可地尔对ET1胞膜超极化能抑制电压依赖的钙通道开放刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用,,、同样还可以影响细胞离子转运系统从而导厉土:n=68L()细胞数为10个/)+3致细胞内C犷外排或抑制胞内钙储存部位〔H」胸腺嚓陡掺人处理组。一的填充而胞内钙是重要的第一信使物质之(K鞠,创11)061,。,对照士009一可调控细胞增殖本研究进一步证明这·_一1eE-T1IlI44士04。种抑制是通过下调妙44/2表达而实现的..~omn扫o一1eET110mlL53士09,.一7poJ一1bNIC10+El10mlI30土
