酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性原因分析.pdf

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1、中国中医药咨讯2010年7月上第2卷第13期·88·JournalofChinaTraditionalChineseMedicineInformationJuly2010Vo1．2No．13酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性原因分析王秀华(尚志市疾病预防控制中心，黑龙江尚志，150600)【关键词】酶联免疫吸附测定；梅毒血清诊断；假阳性反应梅毒是苍白螺旋体引起的一种性传播疾病．梅毒血清假阳性。学检测一直是梅毒实验诊断的主要方法，但也存在假阳性3操作因素的问题。近年来在我国的发病率呈逐年上升的趋势，对梅洗涤过程中有溢出现象，使强阳性标本的反应液污毒作出

2、快速、准确的诊断是非常重要的。目前临床上梅毒染临近的阴性孑L而出现假阳性；洗涤时间短或洗涤次数的诊断主要是根据临床症状和血清学检查，酶联免疫吸附少，使洗涤不充分，板孔中酶试剂残留而出现假阳性；底物法fEHSA)对IgG、IgM都有很好的检测能力[1]，因其灵敏液反复使用被污染或受到强光照射时间过长也会出现假度高、价格低廉、操作方便、结果客观在国内广泛使用。但阳性；判读结果或登记、发报告时错位，出现错报的假阳性在工作中遇到的最大问题是出现假阳性的问题，为避免假结果。阳性结果的出现，现将产生假阳性的原因作以总结如下：4仪器因素1机体的内在因素4．1酶标

3、仪使用的影响酶标仪是ELISA试验所必须的1．1年龄因素有些老年人梅毒检测结果阳性，而无临床仪器，它是对反应孔进行垂直比色，当反应板底部有污染症状，也无发病史和疾病接触。ELISA试剂盒主要是选时，容易出现吸光度值升高，导致假阳性的结果。自梅毒螺旋体外膜的脂蛋白47KD、17KD、15KD为分子4．2拖带阳性全自动加样仪加样时不是一份标本一个抗原，用基因重组表达和BOC氨基固相法得到多肽抗加样头，虽然仪器能对加样针内壁和外壁自动清洗，但遇原，为使小分子多肽有较好的吸附性，再用人血清白蛋白到高浓度抗体标本时，由于加样针清洗程度不够，同一加与之连接，而

4、且合成后的多肽一般不做提纯，直接作为试样针拖带污染导致其后一孔甚至多孔出现假阳性的现象。剂抗原使用。由于抗原不纯和使用了人血清白蛋白，增加5方法学因素了意外假阳性抗原位点的可能。老年人容易出现免疫功能5．1灰带区现象梅毒ELISA测定是一种定性试验，须的异常，易产生一些针对连接用的白蛋白的抗体或一些异在阳性与阴性之间有一条明确的分界线，即阳性判定值常蛋白质而干扰了检测的结果出现假阳性。(Cutoff)，通常将以Cutof值左右的一定范围定为灰带1．2疾病因素某些疾病例如系统性红斑狼疮、丙型肝区。测定结果在灰带区的标本易出现假阳性，应通过确认炎、艾滋

5、病、麻风、Lyme病、肝硬化、淋巴肉瘤、结肠癌、生殖试验或跟踪检测来确定是阳性还是阴性。器疱疹、糖尿病、海洛因成瘾及妊娠等可出现检测结果假5．2空白对照的影响用单波长法测定ELISA结果时，设阳性。本文发现白血病、冠心病、脑供血不足等内科慢性病置空白对照对测定结果的准确性有很大的影响。由于反应亦引起出现假阳性，提示患有难以治愈的慢性疾病患者长孔有划痕，可使测定A值升高，如果不设空白对照，判读结期用药可使机体免疫机能发生改变，出现抗原一抗体交叉果时可引起假阳性。反应，干扰试验结果，导致出现假阳性。综上所述，在工作中出现可疑的阳性标本时，应仔细2标本因

6、素查找干扰因素，并重抽血复查，如果还不能确定的标本应2．1标本处理不完全血液抽取后未完全凝固即离心分建议其定期随访，用PCR检测梅毒DNA，必要时做确证试离血清，纤维蛋白未完全析出，容易在板孔中形成纤维蛋验来确定结果，避免假阳性报告的发出。白薄膜或絮状物，造成洗板时清洗不干净，酶残留在相应的板孑L中，使吸光度值偏高，造成假的阳性结果。2．2标本溶血标本溶血时细胞内液的各种活性酶及具有酶样活性的物质可与底物非特异性结合；Hb具有类过氧化物酶的活性，其效应与辣根过氧化物酶类似，溶血后参考文献反应孔非特异性吸附Hb，洗涤时不易洗去，催化底物产生[1]傅均

7、星，周潇，曾铁兵．基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体一定程度的显色，使本底吸光度值升高而造成假阳性[3]。抗体检测中的评价[N]．南华大学学报(医学版)，2004，32(3)：3052．3标本被细菌污染标本采集后及分离血清时应避免306，314．细菌污染，因一些细菌体内可能含有内源性辣根过氧化物[2l周毅．老年梅毒螺旋体感染5l例调查与分析[J]．中国现代医酶，会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰，药杂志，2004，6(5)：7．[3]彭明喜．酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析造成弱的假阳性结果。[J]．现代实用医学杂志，200

8、6，18(2)：1271282．4标本保存不当标本在冰箱存放过久，易使细菌繁殖，会影响结果的测定；存放过久的标本，血清中I