elisa法检测丙型肝炎抗体的假阳性原因分析

《elisa法检测丙型肝炎抗体的假阳性原因分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、司眶

2、园啊

3、日2013年12月第11卷第36期·临床研究·383ELISA法检测丙型肝炎抗体的假阳性原因分析伊新奎(漯河市第三人民医院检验科，河南漯河462000)【摘要】目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)在检测丙型肝炎抗体(HCV-Ab)的过程中出现假阳性的原因，并找出一些解决办法。方法对ELISA法检出的HCV-Ab弱阳性血清标本做确证试验，用核酸扩增荧光基因分析法测定其HVC—RNA，确定其假阳性率，分析引起假阳性的因素和寻找解决方法。结果80例ELISA法检出的HcV-Ab弱阳性血清标本，经核酸扩增荧光基因分析法测定后有阳性64例，以核

4、酸扩增荧光基因分析法为准，ELISA法丙型肝炎抗体检测假阳性率为2O％。存在】6例假阳性，假阳性率为2O％(16／8O)。两种方法比较，差异具有统计学意义(P<0．05)。结论ELISA检测HCV抗体出现假阳性有许多影响因素，除了要尽量消除这些因素外，对于怀疑其为假阳性的血清标本要检测丙型肝炎病毒RNA确诊。【关键词】酶联免疫吸附试验；核酸扩增荧光基因分析法；丙型肝炎抗体；假阳性中图分类号：R446；R512．6+3文献标识码：B文章编号：1671—8194(2013)36-0383-01丙型肝炎是由HCV引起的传染性疾病，目前诊断丙型肝炎的主要问

5、题，在检验过程中有很多因素可能导致检测结果为假阳性。依据是检测患者血清丙型肝炎抗体(HCV-Ab)。酶联免疫吸附试验ELISA法的原理是抗体与抗原的特异反应结合底物与酶的颜色反由于操作简单且具有高特异性，被广泛地应用在临床检~HCV-Ab。应来判断结果的J。类风湿因子干扰、SOD的干扰、抗原不纯、标本溶但是在应用ELISA法检测丙型肝炎抗体时存在很多可能导致检测结果血、被污染、贮存时间太长、凝固不全以及试剂盒抗原不纯、洗板不彻是假阳性的影响因素。本次研究对ELISA法检测出的HCV-Ab弱阳性底等诸多因素都有可能导致检测结果呈假阳性。如果血清中有类

6、风湿因血清标本，用核酸扩增荧光基因分析法检测其HCV-RNA，确证ELISA子那么它可能与固相IGG、酶标IGG结合，在检测时出现假阳性。如果血法试验复检的结果，并分析了出现假阳性检验结果的影响因素并提供清标本中的SOD升高也可能会导致HCV-Ab检测结果出现假阳性。而HCV了一些解决方法。基因工程抗原不纯也容易出现假阳性结果，尤其易出现弱阳性。1资料与方法在日常检验工作中检验人员～定要严格按照操作规程进行检验，1．1一般资料对怀疑其存在假阳性的血清标本要测定其HCV-RNA，确保检验的准8O例ELISA法检出的HCV-Ab弱阳性血清标本均采1~2

7、010年3月至确度，避免出现假阳性结果。为避免假阳性的出现，检验人员应注2012年3月我院肝病科收治的患者。意：如果血清标本是凝固血，应现将标本自然放置1h，再离心分离1．2仪器和试剂15rain，如果血清标本是抗凝血，在采血后必须立即颠倒5次以上，存ELISA法试剂盒由上海科华提供，酶免仪和洗板机由北京普朗提放一段时间后，离心分离I5min【4J。及时将加样后的加贴封片放入恒温供。核酸扩增荧光基因分析法试剂盒由达安基因提供，采用DA一7600箱里。在加酶试剂的时候不要将水滴到孔外，如果滴到孔外，要及时核酸扩增实时荧光基因分析仪川。用吸水纸轻拭吸干

8、。洗板要彻底，保证洗板针通畅，将洗液注满每一1．3检测方法个孔，洗完后用吸水纸吸干。不要混用不同批号的试剂，加显色剂采患者清晨空腹静脉血3~5mL，将其离心分离血清，先用ELISA的时候注意不要流到孔外，在检测前将试剂放置在室温下30min。法检测HCV-Ab(1～2h内)3次，对3次结果均为弱阳性的标本，用核综上所述，影D~ELISA法检测血清标本HCV-Ab~现假阳性的因素酸扩增荧光基因分析法检测其HCV-RNA。除了试剂盒质量和仪器性能外，还有血清标本的处理和操作不当等也1．4数据处理会引起假阳性的出现。检验人员应该规范操作，尽量消除假阳性出

9、现采用SPSS11．O统计学软件包对数据结果进行统计分析，当的影响因素，对于可疑的假阳性血清标本最好采用核酸扩增荧光基因P

10、验医学杂志，2006，29(7)：577—580．20％(16／80)。两种方法比较，差异具有统计学意义(P<0．05)。