实验六-从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖.doc

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1、实验六　从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖教学要求:　　　1掌握通过等电点分离蛋白质的原理和方法；　　　2掌握蛋白质鉴定的特征反应；　　　3掌握还原性糖的鉴定方法。教学重点：掌握通过调节溶液体系的pH值利用等电点分离蛋白质。教学难点：蛋白质和还原性糖鉴定反应的操作及其现象观察教学时数：4学时一、实验目的１、掌握分离蛋白质和糖的原理和操作方法；２、掌握蛋白质的定性鉴定方法；３、了解乳糖的一些性质。二、实验原理　　牛奶的主要成分是水、蛋白质、脂肪、糖和矿物质，其中，蛋白质主要是酪蛋白，而糖主要是乳糖。　　蛋白质在等电点时溶解度最小，当把牛奶的ＰＨ值调到4.8时(酪蛋白的等电点),酪

2、蛋白便沉淀出来。酪蛋白不溶于乙醇和乙醚，可用乙醇和乙醚来洗去其中的脂肪。　　乳糖不溶于乙醇在滤去酪蛋白的清液中加入乙醇时，乳糖会结晶出来。三、实验步骤　　１、酪蛋白与乳糖的提取　　４g奶粉与80mL40℃温水调配均匀，以10%乙酸调节pH=4.7(用精密pH试纸测试)，静置冷却，抽滤。　滤饼用6mL水洗涤，滤液合并到前一滤液中。滤饼依次用6mL95%乙醇，6mL乙醚洗涤，滤液弃去。滤饼即为酪蛋白，晾干称重。　　在水溶液中加入2.5g碳酸钙粉，搅拌均匀后加热至沸，过滤除去沉淀，在滤液中加入1～2粒沸石，加热浓缩至8ml左右，加入10ml95%乙醇（注意离开火焰）和少量活性炭，搅

3、拌均匀后在水浴上加热至沸腾，趁热过滤，滤液必须澄清，加塞放置过夜，乳糖结晶析出，抽滤，用95%乙醇洗涤产品，晾干称重。　　２、酪蛋白的性质　　缩二脲反应　取10ml酪蛋白溶液，加入10%NaOH溶液2ml后，滴入1%CuSO4溶液1ml。振荡试管，观察现象(溶液呈蓝紫色)。　　蛋黄颜色反应　取10ml酪蛋白溶液，加入浓硝酸2ml后加热，观察现象（有黄色沉淀生成）。再加入10%NaOH溶液2ml，有何变化?(沉淀为橘黄色)3、乳糖的性质　　Fehling反应　Ｆehling试剂A和Ｂ各3mL,混匀，加热至沸后加入0.5mL5%乳糖溶液，观察现象。　　Tollen反应　在2mLT

4、ollen试剂中加入0.5mL5%乳糖溶液，在80℃中加热，观察现象(有银镜生成)。四、实验结果品名性状产量收率五、问题与讨论１、本实验中是如何将蛋白质和糖分开的？２、用乙醇和乙醚洗涤时主要除去的是哪类物质？３、加入碳酸钙粉末有什么作用？