齐墩果酸诱导多种小鼠胚胎干细胞向生殖细胞方向分化研究.pdf

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1、·232·WORLDCHINESEMEDICINEFebruary．2015，Vo1．10，No．2齐墩果酸诱导多种小鼠胚胎干细胞向生殖细胞方向分化研究万谦，姚奏英，伍林涛陆华’(1成都中医药大学第二附属医院，成都，610041；2四川省计划生育研究所，成都，610041；3成都中医药大学l临床医学院成都，610075；4贵州省油菜研究所，贵阳，s5ooo8)摘要目的：寻找一种能诱导多种胚胎干细胞向生殖细胞方向分化的化合物，并以常用的诱导物维甲酸(RetinoicAcid，RA)作为阳性参照物。方法：分别培养小鼠胚胎干细胞1B10、D3、R1／E，诱导它们形成拟胚体

2、，让拟胚体贴壁生长，加入特定化合物诱导贴壁细胞分化，诱导72h后，提取被诱导细胞的RNA，再合成cDNA，最后利用实时荧光定量PCR检测各被诱导细胞中与生殖分化相关的基因的表达水平的变化。结果：发现齐墩果酸(OleanolicAcid，OA)显著上调了所有被研究的小鼠胚胎干细胞的生殖分化关键基因的表达水平，同时发现阳性参照物RA仅能诱导1B10、RI／E，而不能诱导D3向生殖细胞方向分化。结论：OA能诱导多种胚胎干细胞向生殖细胞方向分化，诱导能力方面具有比常用诱导物维甲酸更广泛的普遍性。关键词齐墩果酸；小鼠胚胎干细胞；体外分化诱导物；生殖方向分化StudyonOle

3、anolicAcidInducingSeveralStrainsofMouseEmbryonicStemCeilstoDiferentiationtowardsGermCeilsWanQian-一．YaoZouying．WuLintao。LuHuat。(1TheSecondAffiliatedHospital，ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine，Chengdu610041，China；2SichuanFamilyPlanningResearchInstitute，Chengdu610041，China；3The

4、AffiliatedCollegeofMedicalSciences，ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine，Chengdu610075，China；4GuizhouRapeInstitute，Guiyang550008，China)Abstract0bjective：Tofindanagentwhichcaninduceseveralstrainsofembryonicstemcellstodifferentiatetowardsgermcells，withthecommoninducerretinoicacid

5、(RA)aspositivecontro1．Methods：Differentstrainsofmouseembryonicstemcells(mESC)1B10，D3，R1／Ewererespectivelycultured，andinducedtoformembryoidbodies(EBs)whichwereallowedtoattach；differentcompoundswerethenaddedtointervenetheattachedcells；theintervenecontinuedfor72handRNAwereextractedandcDNA

6、weresynthesized；finally，real—timefluorescencequantitativePCR(qPCR)assaywereusedtomeasurethetranscriptionalexpressionpatternsofl1reproductivedifferentiationrelatedgenes．Results：Itwasfoundthatoleanolicacid(OA)caninduceall3strainsofmousemESCtodifferentiatetowardsgermcellsandthepositivecon

7、trolRAcanonlyinducemESC一1B10andmESC．R1／Etodifferentiatetowardsgermcels．RAcannotinducemESC．D3todifferentiatetowardsgermcells．Conclusion：0AcaninduceseveralstrainsofembryonicstemcelstodifferentiatetowardsgermcellsandithasbroaderuniversalitythanthepositivecontrolRA．KeyWordsOleanolicacid；