黄芩苷对肠上皮细胞缺氧复氧损伤后屏障功能的影响.pdf

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1、中华实用儿科临床杂志2015年4月第30卷第7期ChinJApplClinPediatr．April2015，Vo1．30．No．7·消化营养性疾病·黄芩苷对肠上皮细胞缺氧复氧损伤后屏障功能的影响任翔傅廷亮马明明冯文玉程风春耿磊郑步峰刘希杰【摘要】目的探讨黄芩苷对肠上皮细胞缺氧复氧损伤后屏障功能的影响。方法建立大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)缺氧复氧损伤模型。采用3一(4，5-二甲基-2．噻唑基)_2，5一二苯基四氮唑嗅盐(MTY)比色法检测细胞增殖，筛选黄芩苷浓度。设立对照组，缺氧复氧组，缺氧复氧+5

2、．0×10mol／L黄芩苷组，缺氧复氧+1．0×10moL／L黄芩苷组，缺氧复氧+0．2×10moL／L黄芩苷组；采用紫外线分光光度计检测细胞上清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平；Westernblot方法检测细胞紧密连接蛋白Occludin和ZonulaOccludens1(ZO一1)的表达及核因子一KB(NF—KB)蛋白表达水平；实时荧光定量一PCR法检测Occludin和ZO一1mRNA表达水平。结果M1丫r比色法显示黄芩苷可缓解缺氧复氧对细胞增殖的抑制(对照组吸光度值：0．44

3、2±0．015，缺氧复氧组：0．256±0．007，缺氧复氧+5．0×10mol／L黄芩苷组：0．407±0．008；F：66．904，P<0．05)。缺氧复氧组较对照组细胞上清中MDA水平增加[对照组：(3．502±0．231)mol／L，缺氧复氧组：(5．541±0．143)mol／L]，SOD水平减少[对照组：(20．073-4-0．493)×10U／L，缺氧复氧组：(13．324±0．081)×10U／L]，Occludin和ZO一1的蛋白、mRNA表达量减少，NF—KB(P65)蛋白表达量增

4、加(P均<0．05)。与缺氧复氧组相比，黄芩苷各组随黄芩苷水平升高，细胞上清中MDA水平逐渐减少[缺氧复氧+5．0×10mol／L黄芩苷组：(4．320±0．106)mol／L，缺氧复氧+1．0×10mol／L黄芩苷组：(4．578±0．080)mol／L，缺氧复氧十0．2×10mol／L黄芩苷组：(4．928-4-0．118)mol／L]，SOD水平增加[缺氧复氧+5．0×10mol／L黄芩苷组：(18．462±0．284)×10U／L，缺氧复氧+1．0×10mol／L黄芩苷组：(16．624±0．

5、364)×10U／L，缺氧复氧+0．2×10mol／L黄芩苷组：(14．0234-0．140)×10U／L]，Occludin和ZO·1的蛋白、mRNA表达量增加，NF—KB(p65)蛋白表达量减少(P均<0．05)。结论黄芩苷可通过降低NF—KB的活性减轻缺氧复氧对肠上皮细胞屏障的损伤。【关键词】黄芩苷；肠屏障；缺血再灌注，缺氧复氧；紧密连接蛋白EfectsofBaiealinonbarrierdysfunctionofintestinalepithelialcellsinducedbyhypoxi

6、areoxygenationRenXiang，FuTingliang，MaMingming，FengWenyu，ChengFengchun，ngLei，ZhengBufeng，LiuXijie．DepartmentPediatricSurgery，HospitalofBinzhouMedicalUniversity，Binzhou256600，ShandongProvince，ChinaCorrespomtingauthor：FuTingliang，Email：drfutl@sina．com【Abst

7、ract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofBaicalinonbarrierdysfunctionofintestinalepithelialcellsinducedbyhypoxiareoxygenationinjury．MethodsHypoxiareoxygenationinjurymodelsofratsintestinalepithelialcell一6(IEC一6)wereestablished．OptionalBaiealinconcentration

8、waschosenbydetectingcellproliferationbyusingmethyhhiazolyltetrazolium(MTF)assay．IEC一6cellswererandomlydividedinto5groups：normalcontrolgroup，hy—poxiareoxygenationgroup，hypoxiareoxygenation+5．0×10一mol／LBaicalingroup．hypoxiareoxygen