雷帕霉素联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡和自噬及对细胞侵袭力的影响.pdf

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1、中临床瞑师杂志r电子版)2014年4月第8卷第7期ChinJC1inicians(ElectromcEdifion)．April1,2014．v01．8。NQ·基础论著·雷帕霉素联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡和自噬及对细胞侵袭力的影响叶献词薛刚束庆文【摘要】目的研究雷帕霉素联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡、自噬及其对细胞侵袭转移能力的影响。方法将雷帕霉素以及顺铂分别或联合作用于HcpG．2细胞，采用MTT法检~dHepG．2细胞增殖抑制情况，采用透射电镜、流式细胞仪检测HepG-2细胞凋亡，采用MDC染色、转染pGFP．LC3检测细胞自噬，用Transw

2、elldx室测定HepG．2细胞对细胞外基质的侵袭力。结果与对照组相比，单独应用雷帕霉素组未出现明显的细胞凋亡情况；单独应用顺铂组细胞凋亡情况较明显，凋亡率达到(21．27±3．65)％；顺铂联合应用雷帕霉素组细胞凋亡率最高，达到(43．33±5．64)％。雷帕霉素组、顺铂组和顺铂联合应用雷帕霉素组HepG．2细胞均出现点状的自噬泡，顺铂联合应用雷帕霉素组自噬泡数量显著高于雷帕霉素组和顺铂组。雷帕霉素组、顺铂组和顺铂联合应用雷帕霉素组对HepG-2细胞侵袭抑制率分别为(19．2±5．1)％、(47．8±4．1)％和(78．0±2．4)％。结

3、论顺铂可直接诱导HepG-2细胞凋亡，雷帕霉素本身不诱导HepG-2细胞凋亡，但其可显著促进顺铂诱导的HepG-2细胞凋亡；同时顺铂和雷帕霉素均可直接诱导HepG-2细胞自噬，但两者联合应用促进HepG-2细胞自噬情况非常明显。体外侵袭实验结果表明顺铂联合应用雷帕霉素可显著降低HepG-2细胞的体外侵袭能力。【关键词】西罗莫司；顺铂；自噬；细胞凋亡Effectofrapamycinandcisplatinoncellapoptosis，autophagyandinvasioninhepatomacarcinomacellXianci,Xue

4、Gang,ShuQingwen．DivisionofGastroenterology,thePeoples'HospitalofTongling,Tongling24400~ChinaCorrespondingauthor．"YeXiancLEmail：yxcc1973@126．com[Abstract]ObjectiveToobservethecellapoptosis，autophagyandinvasionofrapamycincombined、vithcisplatininhepatomacarcinomacel1．MethodsR

5、apamycinandcisplatinweremixedwithHepG·2cells，thecellapoptosiswasdetectedbytransmissionelectronmicroscopyandflowcytometry，thecellautophagywasdetectedbyMDCstainandtransfectedpGFP—LC3．Matrigel-transwellchambermethodwasusedtoevaluatethecellabilitiesofmetastasisandehemotaxis．Re

6、sultsComparedwiththecontrolgroup，rapamycingroupdoesnotappearobviousapoptosis．Theapoptosisrateofcisplatinal0negroupreachesto(21．27a：3．65)％．Theapoptosisrateofcisplatincombinatedwithrapamycingroupisthehighest,whichreachesto(43．33：k5．64)％．Punctateofautophagicvacuolesweredetect

7、edinrapamycingroup，cisplatingroupandcisplatincombinatedwithrapamycingroup．Autophagicvacuolesincisplatincombinatedwithraparnycingroupweresignificantlyhigherthanrapamycinhormonegroupandcisplatingroup．TheHepG-2cellinvasioninhibitionratewas(19．2~5．1)％，(47．8~4．1)％and(78．0~2．4)％

8、inrapamycingroup，cisplatingroupandcisplatincombinatedwithrapamycingroup．ConclusionsCispla