衣霉素对顺铂诱导人宫颈癌细胞凋亡的影响.pdf

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1、MedJChinPLA，Vo1．38，No．4，April1，2013283论著衣霉素对顺铂诱导人官颈癌细胞凋亡的影响徐冶，李质馨，曹慧玲，于洋，刘师兵，王晓军[摘要]目的探讨内质网应激在顺铂诱导人宫颈癌HeLa~胞凋亡中的作用。方法取人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象，实验分为衣霉素(Smg／L)组、顺铂(6mg／L)组、衣霉素(5mg／L)与Jt~fl(6mg／L)联合给药组、阴性对照组，处理12h后采用MTT法观察细胞生长情况，Hoechst荧光染色检测细胞核形态的变化，免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase一

2、3、Caspase．4活化情况，间接免疫荧光法检测蛋白质二硫键异构酶(PDI)、磷酸化H2AX组蛋白(．H2AX)的表达变化。结果MTT法检测显示衣霉素组、顺铂组、联合给药组和阴性对照组的细胞增殖抑制率分别为2．65％±2．7l％、19．60％4-4．34％、44．69％±7．07％、0，除衣霉素组与对照组外其余各组间两两比较差异均有统计学意义(P

3、组核碎裂细胞比例(44．s％±5．1％)显著高于顺铂组(22．7％±3．9％，P<0．05)。免疫印迹法检测显示，顺铂组裂解Caspase+3、Caspase一4蛋白表达明显高于对照组和衣霉素组，但显著低于联合给药组(P

4、出现明显绿色荧光，但两组无明显差异。结论衣霉素可增加内质网应激水平，促进顺铂诱导HeLa细胞发生凋亡。[关键词]宫颈肿瘤；衣霉素；顺铂；内质网应激；细胞凋亡[中图分类号]R737．33[文献标识码]A[文章编号]0577．7402(2013)04．0283．05EffectoftunicamycinoncisplatininducedapoptosisofHeLacellsXUYe，LIZhi—xin。，CAOHui-ling，YUYang，LIUShi—bing，WANGXiao—junDepartmentof

5、HistologyandEmbryology,2MedicalResearchLaboratory,JilinMedicalCollege,]ilinCity,Jilin132013,China’Correspondingautho~E—mail：Izx一62@163．cornThiswork1．~assupportedbytheNaturalScienceFoundationofJilinProvincef2Ol015240)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectof

6、endoplasmicreticulumstress(ERstress)incisplatin—inducedapoptosisofhumancervicalcancerHeLacells．MethodsHeLacellswereusedasthestudyobjectwhichweredividedintofourgroups：TUNI(Smg／L)group，cisplatin(6mg／L)group,TuNI(5mg／L)+cisplatin(6mg／L)group,andnegativecontrolgr

7、oup(nodrugtreatment)．MTTassaywasemployedtoexaminethegrowthstatusofthecells．Hoechststainingwasusedtoobservethemorphologicalchangeinthenucleus．ImmunoblottingwasusedtodetecttheactivationofapoptoticproteinsJcaspase一3andcaspase一4．Indirectimmunofluorescencewasusedt

8、oassesstheexpressionoftheproteindisulfdeisomerase(PDI)andphosphorylatedhistoneH2AX(^y—H2AX)．ResultsMTTassayshowedthatthegrowthinhibitionrateswere2．65％±2．71％J19．60％±4．34％J44．69％±7．07％and0％