抗HIV-1 gp120单克隆抗体体外阻断CD4细胞HIV感染的研究.pdf

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1、陕西医学杂志2010年7月第39卷第7期797抗HIV一1gp120单克隆抗体体外阻断CD4细胞HIV感染的研究东南大学第二附属医院(南京210003)赵磊赵伟张永成张亮文剑摘要目的：抗HIV一1gpl20单克隆抗体对细胞感染HIV的拮抗作用研究。方法：制备抗HIV一1gpl20单克隆抗体，鉴定其特性；研究抗HIV一1gpl20单克隆抗体对细胞感染HIV的拮抗作用。结果：构建的重组质粒的外源基因片段经测序与预期HIV一1gpl20抗原基因片段大小一致；高浓度时该单克隆抗体能够抑制HIV病毒的感染，随着抗体浓度的降低，中和实验的抑

2、制率也随之下降；高浓度时该单克隆抗体能够显著抑制病毒的感染，随着抗体浓度的降低，HIVgpl20RNA定量增高。结论：获得6株稳定分泌抗HIV一1gpl20单克隆抗体的杂交瘤细胞株，该抗HIV一1gpl20单克隆抗体具有一定的抗HIV作用。主题词HIV一1／免疫学HIV包膜蛋白质gpl20／免疫学抗体，单克隆聚合酶链反应@细胞，CD4【中图分类号】R512．91【文献标识码】A【文章编号11000—7377(2010)07—0797—05Study0fHIV一1gp120monoclonalantibodyblockingHIV

3、infectionofCD4lymphocyteinvitroexperimentClinicalLaboratoryDepartment，SecondAffiliatedHospitalofSoutheasternUniversity(Nanjing210003)ZhaoLeiZhaoWeiZhangYongchengetalABSTRACTObjective：ToinvestigateHIV1gpl20monoclonalantibodies’antagonisticeffectonHIVinfection．Method：P

4、repareHIV一1gpl20monoclonalantibodyandidentifyit．InvestigateHIV—lgP120monoclonalantibodies’antagonisticeffectonHIVinfection．Results：ExogenousgeneinrecombinantplasmidisinconsistentwithexpectedgeneinHIV一1gpl20antigendetectedbysequencing．Monoclonalantibodyinhigherconcent

5、rationmayinhibitevirusinfectionsignificantly，andasmonoclonalantibodyconcentrationisdecreasing，resultsofquantitativedetectionofHIVgp120RNAisincreasing．Conclusion：6cellstrainsofhybridomasecretingmonoclonalantibodyconsistentlyareobtained，andwhichhavecertainactivitiesaga

6、instHIVinfection．KEYWORDSHIV一1／immunologyHIVenvelopeproteingp120／immunologyAntibodies，monoclonalPolymerasechainreationCell，CD4全球流行的HIV根据血清反应和病毒核酸序列择为gp120保守序列，从而可防止因病毒变异而导致可分为两型：HIV一1型和HIV一2型_1]。HIV一1型广泛的无效免疫，为进一步研制抗HIV治疗性抗体奠定基分布于世界各地，是引起全球艾滋病(AIDS)流行的主础。要病原，所以目前HIV的

7、研究主要集中在HIV一1型。材料和方法HIV一1型的包膜糖蛋白(env)基因编码gpl60蛋白，进1单克隆抗体制备与鉴定载体质粒PEGX一一步加工成gp120及gp41，具有较强的抗原性[2]。HIV4T一2用BamHI、XhoI酶切，T4DNALigase连接的感染主要是通过病毒外壳蛋白gp120三聚体与CD4gpl20基因片段，重组质粒转化人大肠杆菌XL1一blue，受体以及趋化因子协同受体(主要是CCR5与送南京金思特科技有限公司测序。HIV一1gp120基因CXCR4)结合进行。而且，单体gpl20可诱导中性细胞片段由卫

8、生部抗体技术重点实验室朱进博士提供。基与CD4细胞死亡，并与疾病发病相关]。迄今为止，人因序列为5l，_GATCCGGTGAACTGGACAAATGGG类尚没有治疗或预防艾滋病的特效药物或疫苗，但研CAGGCCCGGGTCGTGCATTCTACGAGCTGGAT