酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用.pdf

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1、临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2015Jun；31(6)·709·网络出版时间：2015—6—2413：59网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1073．R．20150624．1359．038．html酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用迈新===技术交琉高宝莲，钱萍，沈志炜，胡泊，马祯一关键词：酵素水溶液；冷冻切片；染色分化(1／10水的量)，轻轻搅匀，使其融化。放入生鲜蔬果垃圾中图分类号：R446．8文献标志码：B(3／10水的量)，

2、轻轻搅匀，使其浸泡于红糖水中。将塑料容文章编号：1001—7399(2015)06—0709—02器的盖子旋紧，并于容器上注明日期，放置在阴凉、通风之doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2015．06．032处。第1个月需要每天打开容器盖释放出因发酵产生的气体之后并立即旋紧容器盖。1个月之后不会再有气体产生，冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要继续静置3个月，制成棕黄色酵素原液，pH值控制在3～4。手段，切片质量的好坏直接影响快速诊断的结果及科研的可酵素原液与纯净水1：l配制成

3、酵素水溶液。靠性。影响冷冻切片质量的因素很多，分化液是其中之一。1．31％盐酸乙醇液制作方法盐酸0．5ml，75％乙醇100酵素又称为酶，具有催化、净化等作用，现今在生产、生活中ml，二者混合。广泛应用，如清洗、灭菌、净化、美容、减肥等。有关其在病理1．4冷冻切片选取我院2013年7月～2014年7月的冷切片制作中的应用尚未尝试。作者在不同组织冷冻切片染冻切片标本，包括乳腺、甲状腺、卵巢、淋巴结、子宫等组织。色中利用酵素水溶液分化，以期探索出提高切片染色清晰使用LEICACM1900冷冻切片机切片。将冷

4、冻切片机预降度、对比度，优化冷冻切片质量的方法。至一15℃，将进口OTC剂预先放置于组织托上，将每例新鲜1材料与方法标本按0．3cln厚切片，1．5am大小组织放置于包埋剂组织托上，立即放入冷冻切片机内，待组织冻结成白色冰体。修1．1酵素原液制作材料红糖、鲜垃圾(蔬菜叶、水果皮整组织后，连续6m厚切片2张，分别贴附于干净载玻片等)、纯净水(三者重量比1：3：10)，可密封的塑料容器。上，立即放入甲醇固定液中固定1min，水洗，分别进行两种1．2酵素水溶液制作方法将塑料容器装入六成的水(容不同分化液的HE

5、染色：(1)1％盐酸乙醇分化的HE染色：器内留些空间，以防止酵素发酵时溢出容器外)，放入红糖苏木精染色2min，水洗10S，1％盐酸乙醇分化2s，水洗10S，温水返蓝3～5s，伊红染色3S，稍洗，梯度乙醇脱水，二甲收稿日期：2015—01—15苯透明，封固。(2)酵素水溶液分化的HE染色：苏木精染色作者单位：浙江省嘉兴市中医医院病理科，嘉兴314001作者简介：高宝莲，女，硕士，主治医师。Tel：(0573)820705292min，水洗10S，酵素水溶液分化2s，水洗10S，温水返蓝3E—mail：d

6、y-gaobaolian@163．corn～5S，伊红染色3s，稍洗，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，封固。少致癌物的污染，避免对人体的危害；手工操作时，有毒致癌省力、操作简单、结果准确可靠、背景清晰、健康环保等优点，废液直接排放至下水道，不利于环保。(4)全自动免疫组化是病理科工作的好帮手，将成为病理科工作中不可或缺的设仪使用打印机打印的载玻片标签，具有防酸碱、防水、防潮、备之一。耐腐蚀、耐热等功能，终生储存，不褪色，同时也有利于玻片参考文献：的归档；手工操作时，要用铅笔做标记，在操作过程中可能会有铅末脱落

7、到组织上造成污染，且有可能使铅笔字磨损，模[1]杨月红，袁静萍，袁修学，等．自动免疫组化仪的使用体会[J]．糊不清，导致抗体错加。(5)全自动免疫组化仪滴加抗体时临床与实验病理学杂志，2011，27(3)：333—4．设置参数：最小参数为100Ixl；手工操作时可根据组织的大[2]于兰，何松，陈亚丽．全自动免疫组化染色的应用体会小选择所加抗体的量。(6)全自动免疫组化仪处理切片：背[J]．临床与实验病理学杂志，2009，25(2)：215—6．[3]马铁，纪莲，姜卫国．新型全自动免疫组化染色机在临床景清

8、晰，阳性定位准确；但对切片要求较高，切片若是出现厚病理工作中高标准化的应用体会[J]．中国医科大学学报，薄不均、皱褶、气泡等，可导致滴加试剂时出现气泡，致结果2012，41(7)：662—3．反应不均一，造成非特异性染色；且在实际操作中个别抗[4]余琦，李宁，杨江辉，等．全自动免疫组化染色仪与手工免体如CD21，手工操作的切片优于全自动免疫组化仪处理的疫染色的比较[J]．局部手术学杂志，2010，19(2)：83—3．切片。[5]林蓁，田甜