高效液相色谱法测定发酵液中3-羟基丁酮.pdf

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1、粮油食品科技第23卷2015年第1期质量安全高效液相色谱法测定发酵液中3一羟基丁酮汤丹丹，王腾飞，王瑞明(齐鲁工业大学山东省微生物工程重点实验室，山东济南250353)摘要：针对生物法制备3一羟基丁酮的微生物发酵体系，研究了利用高效液相色谱法测定3一羟基丁酮的方法。发酵液高速离心后经0．22Ixm微孔滤膜过滤，以HypersilNH2(300mm×4．6mm，5m)为分离柱，乙腈一水(90：10，V／V)为流动相，流速为1mL／min，检测器为示差折光检测器，柱温和检测器温度均为35℃，在25min内可以完成色谱检测。方法回收率为95．96％一101．2％；RSD为

2、1．69％～2．09％。实验结果证明，该方法是测定发酵液中3一羟基丁酮的快速、有效的定量分析方法，具有样品预处理简单，灵敏度高的优点，适合于指导整个发酵过程中条件的优化及发酵产物的实时监控。关键词：高效液相色谱；示差折光仪；发酵液；3一羟基丁酮中图分类号：TS207．3文献标识码：A文章编号：1007—7561(2015)01—0067—03DeterminationofacetoininfermentationbrothbyhighperformanceliquidchromatographyTANGDan—dan，WANGTeng—fei，WANGRui—min

3、g(QiLuUniversityofTechnology，KeyLaboratoryofMicrobialEngineeringofShandongProvince，JinanShandong250353)Abstract：Theacetoinmicroorganismfermentationsystemwaspreparedbybiologicalmethod．Themethodtodetermineacetoinbyhighperformanceliquidchromatographywasstudied．Thefermentationbrothwaspre—t

4、reatedbycentrifugingandfilteringwith0．22Ixmmicroporousmembrane．AcolumnofHypersilNH2(300mmx4．6mm，5Ixm)withanmobilephasecontainingacetonitrileandwater(90：10，V／V)wasusedfortheanalysisofacetoininfermentationsystem，theflowratewaslmL／min，thecolumnten-peratureanddetectortemperaturewas35℃，thec

5、hromatographywascompletedinjust25min．There-coveryratewas95．96％一101．2％andtherelativestandarddeviations1．69％～2．09％．Themethodwasprovedtobearapidandeffectivequantitativeanalysismethodwithsimplepretreatmentandhighsen-sitivetodeterminetheacetoininfermentationbroth，whichwasfitforguidingreal—t

6、imemonitoringthefermentationprocess．Keywords：highperformanceliquidchromatography；differentialrefractometer；fermentationbroth；ace—toin3一羟基丁酮，又名乙偶姻、甲基乙酰甲醇、醋味，3一羟基丁酮作为香料应用范围极其广泛，用量嗡，自然存在于玉米、葡萄、可可、苹果、香蕉、干酪、也较大，多用于奶油、干酪、咖啡、坚果的香味增强肉类等许多食品中，作为一种食用香料，我国GB剂，同时也可用于配制奶油、乳品、酸乳和草莓型香2760-1986规定为允许食用

7、，美国食品和萃取协会精等。此外，3一羟基丁酮还作为一种重要的平(FEMA)安全号为2008E。由于其特有的奶油香台化合物，广泛应用于食品、化工、制药以及烟草等领域，2004年美国能源部将其列为30种优先开发收稿日期：2014—06—28利用的平台化合物之一l4j。目前工业化生产3一羟作者简介：汤丹丹，1988年出生，女，在读硕士研究生通讯作者：王瑞明，男，博士，教授．基丁酮的主要方法为化学合成法：丁二酮部分加氢囫质量安全粮油食品科技第23卷2015年第1期还原、2，3一丁二醇选择性氧化、丁酮氯化水解等方1．3标准溶液的配制法。该法产品收率低、环境污染严重、原料来