番茄红素培养酵母的生物学效应研究.doc

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1、番茄红素培养酵母的生物学效应研究　　摘要：以酵母菌为材料，在固体和液体培养基中添加不同浓度的番茄红素，进行４轮连续培养，对所得后代测定多种生理生化特征。结果表明，培养基中番茄红素浓度在５０ｍｇ／Ｌ以下时，随着番茄红素浓度的增大，酵母菌细胞的体积、繁殖能力和内含物含量均增长；当超过这一浓度后，上述特征都有所下降。　　关键词：番茄红素；啤酒酵母；生物学效应　　中图分类号：Ｑ４９３．９９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11405－0921-03　　　　TheBiologicEffectofLycopeneonCultu

2、redSaccharomycescerevisiae　　　　ＺＨＡＮＧＱｉａｎ，ＺＨＡＮＧＪｉａｎ－ｍｉｎ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Thephysiologicalcharactersofyeastafter4generationsofcontinuouscultivationinsolidandliquidmediumaddedwithdifferentconcentrationsoflycopenesuchas0，10，20，30，40，50and60ｍｇ／Ｌwereassayed.Ｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎ

3、ｔｒａｔｉｏｎｏｆｌｙｃｏｐｅｎｅｗａｓｂｅｌｏｗ５０ｍｇ／Ｌｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｂｉｌｉｔｙ，ｔｈｅｃｅｌｌｖｏｌｕｍｅ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍａｎｙｉｎｃｌｕｓｉｏｎｉｎｔｈｅｃｅｌｌｏｆｙｅａｓｔｗｏｕｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅｌｙｃｏｐｅｎｅｓｕｐｐｌｙ．Ｂｕｔｔｈｅｓｅｂｉｏｌｏｇｉｃｉｎｄｅｘｅｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｈｅｎｔｈｅｌｙｃｏｐｅｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｅｘｃｅｅｄ５０ｍｇ／Ｌ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｙｃｏｐｅｎｅ

4、；Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ；ｂｉｏｌｏｇｉｃｅｆｆｅｃｔｓ　　　　番茄红素是一种类胡萝卜素，主要存在于番茄等其他新鲜蔬菜中。研究发现，番茄红素清除自由基的能力最强，是胡萝卜素的２倍多，是维生素Ｅ的１００多倍［１－３］。不少专家认为番茄红素在肿瘤的预防和治疗中可能起着决定性作用［４－７］。此外，它还具有保护心血管、增强机体免疫力、保护皮肤等多种生物学功能［８，９］，因而番茄红素广泛用于食品、医药和化妆品领域。本研究以酵母为材料，将一定浓度的番茄红素加入到酵母培养基中，对多轮培养后代进行生理生化指标

5、测定，以探讨番茄红素对酵母的生物学效应，为合理利用番茄红素提供理论依据。　　１材料与方法　　１．１材料　　啤酒酵母，来自山东大学威海分校微生物学实验室。　　番茄红素，纯度８０．５％，橙红色粉末，购自绿谷生物制品有限公司。　　液体基本培养基：马铃薯培养基灭菌后分装入６０ｍＬ三角瓶中，每瓶３０ｍＬ培养液；固体基本培养基：在上述液体基本培养基中添加２％琼脂，倒入培养皿中；处理培养基：在基本培养基中按不同浓度添加番茄红素，浓度分别为：０、１０、２０、３０、４０、５０、６０ｍｇ／Ｌ。依据各种浓度将配制成的固体培养基分别接种于７

6、只培养皿中，用于菌落的培养；液体培养基分别接种于７只三角瓶中，用于菌悬液培养和生长量的检测。　　１．２方法　　酵母菌种先进行液体活化，待液体中菌细胞密度达到１０６个／ｍＬ时，取０．１ｍＬ活化的酵母菌转入１０ｍＬ无菌水中制成菌悬液，每次吸取０．１ｍＬ注入液体培养基中、摇匀，在２６℃±１℃，５０ｒ／ｍｉｎ条件下摇床培养；同时吸取０．１ｍＬ菌悬液注入固体培养基平板上，涂布均匀，培养３ｄ。随后分别从第一轮培养所得各处理组和对照组的酵母菌悬液中取０．１ｍＬ重复上述步骤，继续培养即为第二轮，记为Ｒ２。以此方法再连续培养２轮，分别

7、记为Ｒ３、Ｒ４。每轮所得的酵母菌的菌落或菌悬液除了接种下一轮外，其余均用于生理和生化指标的测定。　　１）酵母细胞直径的测量。从摇匀后的各种处理和对照组的菌悬液中吸取一滴菌液，置于干净的载玻片上，盖上盖玻片，以显微测量技术测定酵母菌细胞的直径，各种处理和对照均测定２０个细胞，计算平均数。　　２）菌悬液细胞密度的测定。从摇匀后的各种处理和对照组的菌悬液随机吸取一滴，置于干净的血球计数板上，利用血球记数法统计菌悬液中细胞密度，测定２０次，计算平均数。　　３）可溶性糖含量测定。在固体培养基上用干净盖玻片刮取０．１ｇ鲜酵母，快

8、速研磨，加入２５ｍＬ去离子水，转移至５０ｍＬ锥形瓶中，沸水浴１０ｍｉｎ。待溶液冷却后，定容至１００ｍＬ。取１ｍＬ于试管中，加入５ｍＬ蒽酮，沸水浴１０ｍｉｎ，在６２５ｎｍ波长下比色测定可溶性糖含量。　　４）蛋白质含量测定。同上取０．１ｇ鲜酵母，加入４ｍＬ蛋白质抽提Ｂｕｆｆｅｒ，快速研磨，６０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，上清液以双缩脲法在５５０ｎ