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《雌激素对成年和老年雌性大鼠血管平滑肌细胞雌激素受体α表达的影响及其机制.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第23卷第6期中国组织化学与细胞化学杂志Vol灡23灡No灡6暋暋2014年12月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYTOCHEMISTRYDecember灡2014雌激素对成年和老年雌性大鼠血管平滑肌细胞雌激素受体毩表达的影响及其机制敖暋锋11121,2*暋沈暋艳暋吴暋艳暋万暋瑜暋宋暋健(1武汉大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系;2武汉大学医学院结构生物学研究中心,武汉430071)暋暋暡摘要暢暋目的暋探讨雌激素对成年和老年雌性大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)雌激素受体毩(ER毩)表达的影
2、响及其机制。方法暋采用RT灢qPCR、Westernblot及重硫酸盐修饰后测序(BSP)的方法,检测体外培养的3灢4代成年(2灢3月龄)和老年(曒灢10灢820月龄)雌性SD大鼠VSMC在无或有生理剂量(10mol/L、10mol/L)17毬灢雌二醇(E2)存在下,ER毩的表达及其启动子区CpG岛甲基化水平的变化。结果暋成年雌性大鼠VSMC无论在有或无雌激素存在时均表达ER毩,且表达水平随雌激素浓度增加而上升。而老年雌性大鼠VSMC无论是在mRNA水平还是蛋白质水平几乎检测不到ER毩表达,即使补充雌激素达最高生理剂量也无
3、法诱导ER毩的重新表达,其ER毩基因启动区CpG岛呈现高水平甲基化。结论暋成年大鼠VSMC表达ER毩,且生理剂量雌激素对其表达具有诱导作用。而老年大鼠VSMCER毩基因由于CpG岛已发生高度甲基化而抑制,生理剂量雌激素对ER毩表达的诱导作用丧失。暡关键词暢暋雌激素;暋血管平滑肌细胞;暋雌激素受体;暋DNA甲基化暡中图分类号暢暋R347.913暋暋暡文献标识码暢暋A暋暋暋暋DOI:10灡3870/zgzzhx灡2014灡06灡001EffectsofestrogenonexpressionofER毩invascularsmo
4、othmusclecellsofadultandoldfemaleratsandthemechanism1,ShenYan1,WuYan1,WanYu2,SongJian1,2*AoFeng(1DepartmentofAnatomyandEmbryolog,WuhanUniversitySchoolofMedicine;2CenterforResearchofStructuralBiology,WuhanUniversitySchoolofMedicine,Wuhan430071,China)暡Abstract暢暋Obje
5、ctiveToinvestigatetheeffectsofestrogenontheexpressionofestrogenreceptoral灢pha(ER毩)inadultandoldvascularsmoothmusclecells(VSMCs)andtheunderlyingmechanism.Meth灢odsVSMCsculturedfromadult(2灢3months)andold(曒20months)femaleSDratswereincubatedinthe灢10灢8absenceorpresenceo
6、fphysiologicalconcentrations(10mol/L,10mol/L)of17毬灢estradiol(E2).Theex灢pressionofER毩wasdetectedwithRealtimequantitativePCR(RT灢qPCR)andWesternblot,andthemethylationofCpGislandintheER毩genepromoterregionwasdetectedbybisulfitesequencingPCR(BSP).ResultsVSMCsfromadultfe
7、maleratsexpressedER毩inbothabsenceandpresenceofE,andthe2expressionlevelincreasedwithrisingE2concentrations.ButinoldfemaleVSMCs,theexpressionofER毩washardlydetectableatbothmRNAandproteinlevelsineithertheabsenceorthepresenceofthehighestphysiologicalconcentrationofE2.B
8、SPanalysisshowedthattheCpGislandintheER毩genepromoterre灢gionoftheseoldcellswashighlymethylated(>80%).ConclusionTheVSMCsofadultfemaleratscanexpressER毩,wit
