维生素e对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响论文

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1、维生素E对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响论文孔亚坤耿秀琴尹俊杰姚兰春周艳红郭献山【摘要】目的探讨维生素E用于防治绝经后女性中枢神经系统退行性疾病的作用及机制。方法采用自然衰老雌性大鼠为动物模型,实验组每日注射维生素E5mg/kg(小剂量组)、15mg/kg(中剂量组)、60mg/kg(大剂量组)(n=8)。采用放免法检测血清雌激素含量,用免疫组化法观察维生素E对海马芳香化酶表达的影响,并与成年大鼠(对照组)对比观察。结果老年对照组较成年对照组雌激素水平下降,中、大剂量组血清雌激素水平回升(P<0.05),海马芳香化酶表达阳性细胞数目多、

2、表达强,大剂量组呈强阳性。结论一定剂量维生素E不仅可以提高血中雌激素水平,而且可以通过增强海马芳香化酶的表达使局部雌激素浓度增加而发挥其神经保护作用。【关键词】维生素E;自然衰老大鼠;雌激素;芳香化酶;神经保护【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofvitaminE(VitE)onestrogenandexpressionofaromataseinhippocampusofsenilefemaleratsandexploretheeffectofVitEonpreventingfrompostmenop

3、ausalfemalecentralnervesystemdegenerativediseasesanditsmechanism.MethodsTheanimalmodelalerats.RatsinloiddleandhighdoseofVitEexperimentalgroups(n=8)g·kg-1·d-1.Thelevelsofserumestrogenmunoassay.Theexpressionofaromataseinhippocampusmunohistochemistry.Resultsparediddleandhighdoseo

4、fVitEgroupsataseinhippocampusfromthetataseinhippocampusinhighdoseofVitEgroupshoedoseofVitEmaynotonlyelevatethelevelofserumestrogen,butstrengthentheexpressionofaromataseinhippocampus,increasecontentoflocalestrogenandprotectthenerve.【KeyinE;Senescentrats;Estrogen;Aromatase;Neuro

5、nalprotection绝经后女性由于卵巢功能减退雌激素减少.freelg·kg-1·3d-1)和小、中、大剂量VitE组(5、15和60mg·kg-1·d-1),腹腔注射连续9in离心10min,取上清,用于雌二醇(E2)的测定。随机取5只大鼠用4%多聚甲醛常规灌流固定,快速取脑,延正中矢状裂把脑对称地分为左右两半,自上丘至视交叉节段作3~4mm冠状连续切片,固定,常规石蜡包埋,用于ARO的测定。1.3血清E2水平检测采用放免法,测定时血清样品取100μl,严格按照试剂盒说明书操作步骤进行,用γ计数仪计数,浓度单位用pg/ml表示。1.4海马区

6、ARO的表达采用SABC法。一抗、试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司,具体操作按说明书进行,DAB显色,苏木素复染。ARO抗体为兔多克隆抗体,工作浓度为1∶100。用PBS代替一抗作阴性对照。光镜下ARO定位于海马区神经元内质网,胞浆内出现棕黄色颗粒的为阳性细胞。观察海马同一部位的齿状回(×400),经日本产Moticam1300照相系统采样后,采用北航医学图像分析管理系统进行分析,计算ARO染色阳性细胞的阳性单位值和平均光密度值,分别为表达含量的多少和强度的大小。1.5统计学处理数据用x±s表示,采用SPSS11.5统计软件包,首先进行方差齐性

7、检验,再行OneelcangiRC,DonCarlosLL.Sexhormonesandbrainaging〔J〕.ExperGeront,2004;39(1112):162331.2孔亚坤,姚兰春,卢长柱,等.维生素E对老年雌性大鼠海马区PS1表达和Aβ生成的影响〔J〕.中国应用生理学杂志,2007;23(2):23740.3BrigeliusFloheR,KellyFJ,SalonenJT.TheEuropeanperspectiveonvitaminE:currentknoJClinNutr,2002;76(4):70316.4

8、PrangeKielJ,RuneGM.Directandindirecteffectsofestrogenonrathi

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