c-Met信号通路的影响-论文.pdf

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1、·l54·中国中医药科技2014年3月第21卷第2期Mar．2014Vo1．21No．2华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长及HGF／c—Met信号通路的影响张永伟翟昌林鲁广(浙江萧山医院·杭州311201)摘要目的：观察华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长的影响，并探讨华蟾素对HGF／e～Met信号通路的影响。方法：利用小鼠肝癌细胞实体瘤模型，设立3个处理组，即荷瘤模型组、5一Fu组和华蟾素组。分别在不同时间切除肿瘤，计量肿瘤的体积，进而观察华蟾素对小鼠肿瘤生长的影响。采用3种不同的处理方法分别处理肝癌细胞，通过Westernblot检测细胞中HGF和e

2、—Met蛋白的表达情况；ELISA检测荷瘤小鼠血清中HGF表达。结果：5一Fu组和华蟾素组小鼠肿瘤生长缓慢，肿瘤体积均明显低于荷瘤模型组(P<0．05)；5一Fu和华蟾素处理的肝癌细胞HGF和e—Met蛋白表达水平均明显降低(P<0．05)；与荷瘤模型组比较，5一Fu组和华蟾素组小鼠血清HGF的表达水平分别降低75％和65％(P<0．05)。结论：华蟾素可以抑制HGWc—Met通路蛋白的表达，抑制荷瘤小鼠肝癌的生长。关键词华蟾素肝癌HGF／C—Met信号通路小鼠EfectsofCinobufotalinonTumorGrowthof

3、Hepatocarcinoma——bearingMiceandHGF／c——MetSignalingPathwayZHANGYong—wei，ZHAIChang—lin，LUGuang(XiaoshanHospitalinZhejiangProvince，Hangzhou311201)ABSTRACTObjective：ToinvestigatetherolesofCinobufotalinonthetumorgrowthofhepatocarcinoma—bearingmice，andexploretheeffectofCinob

4、ufotalinonHGF／c—Metsignalingpathway．Methods：Themicewithhepatocareinomaweredevidedintothreegroups，thetumormodelgroup，5一FutreatedgroupandCinobu—fotalintreatedgroup．Themiceweresaefifiedindifferenttimepointsaftertreatment，andtumorvolumewasmeasured．Thehepatocarcinomacellswe

5、recuhuredby3kindsofmethods，andWesternblotwasperformedtodetecttheproteinlevelsofHGFande—Met，theserumHGFexpressionWasdetenminedbyELISA．Results：Tocomparewithmodelgroup，tumorinmicewith5一FuandCinobufotalintreatmentgrowedslowly，andthetumorvolumesweresmaller(P<0．05)，theexpres

6、sionofHGFande—Metinhepatocarcinomcellsculturedwith5一FuandCinobufotalinwasloweredsignificantly。theexpressionofserumHGFin5一Fuandcinobufotalingroupsrespectivelydecreased75％and65％．Conclusion：CinobufotalincaninhibitHGFande—Metexpression，in—hibittumorgrowth．Keywords：cinobufo

7、talinlivercancerHGF／c—Metsignalingpathwaymice华蟾素(einobufotalin)为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶1．1材料荷瘤小鼠肝癌模型：肝癌移植瘤小鼠由浙江大蟾蜍等的全皮提取制剂，是我国自行研制的二类新药，已列学提供，8周龄，体重20克左右，雌雄兼用。为国家级中药保护品种并已广泛应用于临床。在淋巴瘤和华蟾素口服液：安徽金蟾生化股份有限公司，批号：宫颈癌细胞中，华蟾素具有促进细胞凋亡作用J。另外，华02050；5一氟尿嘧啶注射液(5一Fu)：上海旭东海普药业有蟾索可能通过抑制核糖核苷酸还原

8、酶亚基M2(RRM2)的表限公司，批号：980412。达而抑制子宫内膜癌移植瘤的生长；然而，关于华蟾素对肝癌细胞(HepG)：由浙江大学提供，细胞培养液为含荷瘤小鼠肝癌的生长影响及其作用机制的报道甚少。本研有10％血清的MEMct，购