Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌模型过程中的动态表达-论文.pdf

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1、医学研究杂志2014年5月第43卷第5期·论著·Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌模型过程中的动态表达李韵秋匡志鹏吴继宁孔娜杨帆摘要目的探讨C57BL/6J小鼠诱癌过程中Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo在各阶段的动态表达。方法将95只正常C57BL/6J雄性小鼠随机分为诱癌组5O只(化学诱癌处理)和对照组45只(正常喂养),定期获取小鼠肝组织标本行免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR法和蛋白质印迹法检测。结果免疫组织化学提示,诱癌组Shh、Ptch和Sm

2、o蛋白分别在第6周、第8周和第10周出现弱阳性,均在第16周出现中度阳性,第20周出现强阳性表达,而正常对照组中未检测出三者的表达。RT—PCR法提示,诱癌组小鼠肝组织中ShhmRNA、PtchmRNA和SmomRNA的表达量持续升高,第20周时j者的表达水平均达到最高(ShhmRNA15.986±1.784,PtchmRNA11.272±0.295,SmomRNA10.185±0.716),明显高于同期正常对照组(P<0.05)。蛋白质印迹法提示,诱癌组Shh、Ptch和Smo蛋白分别从第6周、第8周和第l0周

3、起出现弱表达,到第20周时显著增强,而正常对照组中未检测出3种蛋白的表达。结论Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo伴随着小鼠诱发肝癌时间的延长其表达量逐步升高,认为Hedgehog信号通路与小鼠肝癌的发生、发展密切相关。关键词小鼠肝癌Hedgehog信号通路动态变化[中图分类号]R735[文献标识码]ADynamicExpressionofShh,PtchandSmointheHedgehogSignalingPathwayduringtheChemical~inducedLiverCarcinO

4、genesisinMice·LiYunqiu,KuangZhipeng,Wufining,KongNa,rangFan.DepartmentofExperimentalResearch,AffiliatedTumorHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Guangxi530021,ChinaAbstractObjectiveToexploreHedgehogsignalingpathwaymembersShh,PtchandSmodynamicexpressionineachsta

5、geofin-ducedC57BL/6Jmicelivercancerprocess.Methods95normalC57BL/6Jmalemicewererandomlydividedintochemical—inducedgroup(50nliee)andnormalcontrolgroup(45mice).Livertissuewasregularlyobtainedtodetectbyimmun0histochemistry,RT—PCRandwesternblot.ResultsImmunohistoc

6、hemistyshowedShh,PtchandSmoexpressionofthechemical—inducedgroupwereweaklypos—itiveonthe6th,the8thandthe1Othweek.Thenallofthreeappearedmoderateexpressionat16thweekandstrongexpressionat20thweek.Whilethenormalcontrolgroupwasnotdetectedforthem.RFQ—PCRshowedShhmRN

7、A,PtchmRNAandSmomRNAexpressionofthechemical—inducedgroupcontinuedtorise.andatthe20thweekallofthreeexpressionhadreachedthehighestlevel(ShhmRNAwas15.986±1.784,PtehmRNAwas11.272±0.295,SmomRNAwas10.185±0.716),andweresignificantlyhigherthanthenormalcontrolgroup(P<

8、0.05).Western—blotshowedtheShh,PtehandSmoproteinexpressionofthechemical—inducedgroupappearedweakexpressionfromthe6th,the8thandthe10thweek.Atthe20thweek,allproteinsexpressionenhancedsignif

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