MYCT1-TV对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响-论文.pdf

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1、解剖科学进展ProgressofAnatomicalSciences2014May，20(3)：253~256，2617-7—7r-对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响符爽，孙开来，富伟能(中国医科大学1．基础医学院遗传学教研室，2．附属盛京医院血液研究室，沈阳110001)【摘要】目的探讨MYCT1一(Myctarget1)基因过表达对肝癌Be17402细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法将构建的MYCT1一TV—GFP真核表达载体瞬时转染Be17402细胞，通过RT—PCR和荧光显微镜检测转染效率，分别通过MTI"、流式细胞术和Transwell实验检测转染后

2、MYCT1一对Be17402细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。结果转染MYCT1一Tv—GFP后，Be17402细胞活细胞数显著减少，凋亡细胞数显著增加，穿膜细胞数显著减少。结论MYCT1一T表达能抑制Be17402细胞生长和侵袭，促进Be17402细胞凋亡。【关键词】MYCT1一；肝癌细胞；增殖；凋亡；侵袭【中图分类号】R735．7；Q756【文献标志码】A【文章编号】1006—2947(2014)03—0253—04EfectsofMYCT1一onproliferation，apoptosisandinvasionabilitiesofBe17402cellsF

3、UShuang，SUNKai—lai，FUWei—neng(I．DepartmentofMedicalGenetics，and2．DepartmentofHematologyLaboratoryofShengjingHospital，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China)【Abstract】objectiveToexploretheeffectsofMYCT1一overexpressiononproliferation，apoptosisandinvasionabilitiesofBe17402cells．Meth

4、odsMYCT1-TV-GFPexpressionvectorwasgeneratedandtransientlytransfectedintoBe17402cells．TransfectionefficiencywasdetectedbyRT-PCRandconfocalimmunofluorescencemicroscopy．Cellsviability，apoptosisandinvasionabilitywereassessedbyMTI"colorimetric，flowcytometryandtranswellchamberinvasionassays

5、，respectively．ResultsAftertransfectionofMYCT1-TV-GFPexpressionvectorintoBe17402cells，theproportionofviableandtransmembranecellsweresignificantlyreducedandthepercentageofearlyapoptoticBef402cellswassignificantlyincreased．ConclusionOverexpressionofMYCT1-TVcouldpromotecellsapoptosisandin

6、hibitcellsproliferationandinvasionofBe17402cells．【Keywords】MYCT1一hepatocellularcarcinoma；proliferation；apoptosis；invasion肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是功能尚不明确。本研究中，我们将构建好的MYCT1一一种与细胞凋亡、侵袭和转移等细胞生物学行为密TV—GFP过表达载体转染Be17402细胞，采用RT—切相关的复杂性疾病。目前发现的与肝癌细胞的这PCR、MTT、流式细胞术以及Transwell的方法，分别些生物

7、学行为密切相关的基因主要有c一』l、P53和检测MYCT1一在肝癌细胞中的增殖、凋亡和侵袭Bcl2等。能力，以探讨该基因在肝癌发生发展中的作用机制MYCT1一(Myctarget1tmrr~ptvariant1．GenBank及生物学功能，为肝癌的基因诊治提供靶点。accessionNo．GU997693)是我课题组从正常人外周血中克隆得到的MYCT1新的转录本嘲，与肿瘤细胞1材料与方法的增殖、凋亡和侵袭转移能力密切相关。前期研究证实，MYCT1一在包括肝癌在内的多种肿瘤细胞1．1实验材料与试剂中存在表达，但其在肝癌细胞系Be17402中的生物学人肝癌Be1740

8、2细胞(中