NANOG基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义-论文.pdf

《NANOG基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第35卷第1期中山大学学报(医学科学版)Vo1．35No．12014年1月JOURNALOFSUNYAT．SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)Jan．2014·基础研究·NANOG基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义周嘉嘉，陈汝福，邓小耿，周雨，周泉波，张杰，伍耀豪，曾乐祥，邱荣林(中山大学孙逸仙纪念医院外科，广东广州510120)摘要：【目的】基于侧群(sP)细胞分选方法，从肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选SP表型干细胞样肝癌细胞，观察干细胞标记物NANOG基因在该sP表型肝癌

2、细胞中的表达。【方法】采用流式细胞术检测和分选肝癌细胞Huh7和Hep3B中的sP细胞和非侧群(NSP)细胞，细胞生长曲线法检测sP和NSP细胞的增殖能力，Transwell侵袭实验检测sP和NSP细胞的侵袭能力，M1TI1法检测sP和NSP细胞对5一氟尿嘧啶(5一Fu)和阿霉素(DOX)的药物敏感性；Real—timePCR和WB检测sP与NSP细胞中NANOG基因的表达。【结果】肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选的sP细胞比例分别为(53±0．8)％和(13．49±1．0)％。生长曲线表明Huh7和Hep3B

3、的sP细胞的增殖速度快于NSP细胞(P<0．05)，体外侵袭实验结果显示Huh7和Hep3B的SP细胞体外侵袭能力高于NSP细胞(P<0．05)，MTI"结果显示Huh7和Hep3BSP细胞对5一Fu和DOX有耐药性，高于NSP细胞(P<0．05)。Huh7和Hep3BSP细胞NANOGmRNA平均表达水平分别是NSP细胞的4．17和5．51倍(P<0．05)，NANOG蛋白平均表达水平分别是NSP细胞的3．78和5．01倍(P<0．05)。【结论】肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选的sP细胞符合肿瘤干细胞的部分

4、生物学特征，NANOG基因在sP表型干细胞样肝癌细胞中高表达。关键词：肝癌；侧群细胞；肿瘤干细胞；NANOG基因中图分类号：R735．7文献标志码：A文章编号：1672～3554(2014)01—0012—06SignificanceofNANOGGeneExpressioninSPPhenotypeStemCell—likeHepatomaCellsZHOUJia—jia，CHENRu-fu，DENGXiao-geng，ZHOUYu，ZHOUQuan—bo，ZHANGJie，WUYao—hao，ZENGLe—x

5、iang，QIURong-lin(DepartmentofSurgery，SunYat·senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China)Abstract：【Objective】Toisolateandidenti~thebiologicalcharacteristicsofstemcell—likehepatomaceilsfromthehepatomacelllineHuh7andHep3Bbasedonsidepopulation(

6、SP)cellsortingmethod，andtostudytheexpressionofNANOGgeneintheSPphenotypestemcell—likehepatomacells．【Methods】FlowcytometrywasusedtosortSPcellsandnon—sidepopulation(NSP)cellsformhepatomacelllineHuh7andHep3B，theproliferationabilityofSPcellsandNSPcellsweredetected

7、bycellgrowthcurve，theinvasivepropertiesofSPcellsandNSPcellsweretestedbytranswe11assay，thechemotherapeuticdrugsensitivityofSPcellsandNSPceilstowards5-fluorouraeilanddoxorubicinweretestedbyMqq"assay，theexpressionlevelsofNANOGmRNAandproteininSPcellsandNSPcellswe

8、redetectedbyreal—timePCRandWesternblotanalysis．【Results】(5．3±0．8)％and(13．49±1．0)％sPcellsweresortedfromHepatomacelllineHuh7andHep3B，respectively．Growthcurveassayshowedthattheproliferationa