nanog基因在卵巢癌和卵巢肿瘤干细胞中的表达及意义

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1、青岛大学硕士学位论文Nanog基因在卵巢癌和卵巢肿瘤干细胞中的表达及意义姓名：赵乐申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：纪新强20120610Nanog基因在卵巢癌和卵巢肿瘤千细胞中的表达及意义摘要目的探讨胚胎干细胞关键因子N锄og基因mRNA及其蛋白在卵巢癌和卵巢癌肿瘤干细胞中的表达及意义。方法选取10例正常卵巢上皮组织、10例卵巢良性肿瘤及60例卵巢癌组织，采用逆转录酶．聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组织化学PV-6000两步法检测N锄ogmRNA和蛋白表达水平；采用无血清悬浮培养法从SKOV

2、-3卵巢癌细胞株中分离培养肿瘤干细胞，流式细胞术鉴定肿瘤干细胞CDll7表达，采用RT-PCR和WestemBlot方法检测SKOV-3卵巢癌细胞及肿瘤干细胞中N锄ogmRNA及其蛋白的表达水平。结果N锄ogmRNA在卵巢癌组织中的表达水平均高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织(P

3、出肿瘤干细胞，SKOV-3卵巢癌细胞和肿瘤干细胞N锄ogmRNA相对含量分别为0．6044士0．0368，0．8736士0．0537，差异具有统计学意义(P<0．05)，两种细胞N锄og蛋白相对含量分别为0．6364士0．01691．2788士0．0314，差别具有统计学意义(P<0．05)。结论N觚og基因在卵巢癌组织和SKOv．3细胞系中均高表达，其与卵巢癌的发生发展关系密切，可能是卵巢癌干细胞的表面标志物，有望成为新的标志物。硕士研究生赵乐(妇产科学)指导教师纪新强教授关键词：卵巢癌；Nanog；肿瘤干

4、细胞；基因表达；悬浮培养ExpressionandSignificanceofNanoggeneinOvarianCancerandOvarianCancerStemCellsAbstractObjective：ToinvestigatetheexpressionofembryonicstemcellskeytranscriptionfactorNanoginovariancancerandcancerstemcells．Methods：Reverseimmunohistochemistrytranscrip

5、tionpolymerasechainreaction(RT-PCR)andwereperformedtodetecttheexpressionofNanoggenein10casesofnormalovaries．10casesofbenignovari觚tumorsand60casesofovariancancer．Ovariancanerstemcellswereisolatedfromovari锄eelllineSKOV-3andculturedinserumfreemediumbynanospher

6、esuspension．FlowcytometryanalysiswasusedtoexaminetheexpressionoftheeellsurfacemarkerCD1l7inSKOV-3andovari锄cancerstemcells．TheexpressionofNanoggeneinSKOV-3andovariancancerstemcellsweredetectedbylmPCRandWesternBlot．Results：NanoggeneexpressioninovariancancerWa

7、ssignificantlyhigherthanthatinnormalovariantissueandbenignovariantumors(P

8、ated，therelativelevelofNanogmRNAWasO．6044：L-0．0368inSKOV-3and0．8736-士：0．0537inovari锄Rlmorstemcell(P<0．05)．nlerelativelevelofNanogproteinWas0．6364士0．O169inSKOv．3，and1．2788士0．03l4inovari锄tumorstemcell(P<