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1、卵巢肿瘤中ｐ27和CyclinE的表达及意义【摘要】目的研究p27和CyclinE在卵巢肿瘤中的表达及与临床意义和预后的关系。方法应用免疫组化S-P法检测p27和CyclinE在55例卵巢组织（包括正常的卵巢组织、良性、恶性卵巢肿瘤）中的表达情况,分析其与临床病理参数和预后的关系及两指标间的相关性。结果与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤比较,在卵巢癌中p27降低而CyclinE的表达明显升高(P<0.01),p27和CyclinE在卵巢癌中的表达呈明显负相关性(P<0.01)。结论p27和CyclinE的表达水平与卵巢肿瘤的发生、发展及恶性程度密切相关,可
2、能成为卵巢癌恶性程度及预后判定的重要指标。【关键词】卵巢肿瘤p27蛋白细胞周期蛋白E免疫组织化学p27是细胞周期素依赖性激酶的负性调控因子,其蛋白的低表达与多种肿瘤的不良预后密切相关;同时p27和细胞周期素E蛋白表达的相关性也日益受到广大学者的关注。卵巢癌在女性生殖器肿瘤中预后最差,极易转移和复发。这里我们检测卵巢癌组织中细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1(以下简称p27)的表达,探讨卵巢癌的发生和转移等生物学行为,为评估卵巢癌预后提供理论依据。1材料和方法1.1研究材料收集齐齐哈尔医学院第一附属医院1994～20
3、05年手术切除的卵巢肿瘤标本和手术切除的正常卵巢组织常规石蜡包埋的存档标本。随机选取55例,其中15例正常卵巢组织，16例卵巢良性肿瘤,24例卵巢恶性肿瘤。经病理医生确诊,术前均未行任何治疗。年龄24～69岁,平均53岁。1.2方法应用免疫组化SLAB法。试剂盒均购自北京中山生物公司。组织6人p27kip1抗体(S*53G8)(1∶50)室温下孵育至少3小时。二抗孵育1小时。DAB显色,苏木精复染,脱水、透明、封片。每次实验PBS代替一抗作为阴性对照,用已知阳性标本作为阳性对照。1.3结果判定免疫组织化学结果判断CyclinE和ｐ27以细胞核或胞浆出
4、现棕黄色颗粒为阳性反应,每张染色切片先用低倍镜(10×10)选择10个有代表性的视野,再换用高倍镜(10×40)计数每一个视野中阳性细胞数占所有细胞数的比例,<10%为阴性(-),>10%为阳性(+)。1.4统计学处理采用SPPS13.0系统分析软件,统计用计数资料的χ2检验,P<0.05为有显著统计意义。2结果2.1p27在各种卵巢组织中的表达情况p27在非癌病变组织中的表达水平较高。p27在卵巢癌组织中的表达水平低于在各非癌病变组织中的表达水平,差异有非常显著性(P<0.01),见表1。表1p27和CyclinE在
5、不同卵巢组织中的表达情况 略2.2CyclinE在各种卵巢组织中的表达情况与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤比较卵巢癌中CyclinE的表达明显升高(P<0.01)。2.3卵巢癌组织中p27和CyclinE的表达关系p27阴性者的CyclinE阳性表达显著高于p27阳性者(P<0.01)，呈明显负相关性，见表2。表2卵巢癌组织中p27和CyclinE的表达关系p27的表达略3讨论肿瘤的发生是由内部因素和外部环境的多种原因造成的。近年来发现，肿瘤的恶性增生从生物学角度看主要表现在两方面：一是肿瘤细胞的"不灭性"，即凋亡障碍；二是肿瘤细胞分裂的失控性，呈现为无
6、限制的自主的增生。因而从细胞周期和调控方面研究肿瘤的发生发展是肿瘤研究的热点之一。癌基因的激活和抑癌基因的失活在肿瘤的发生、发展中起重要作用。癌基因CyclinE作为细胞周期正调控因子,是细胞进入S期的关键性调节基因［1］；抑癌基因p27是Polyak等［2-3］于1994年在经TGF-B处理和细胞接触抑制所致的生长抑制细胞中发现的一种相对分子质量为27ku的热稳定蛋白。p27kip1作为细胞周期的负调控因子,是一种多功能CDKI(cyclindependentkinaseinhibitorCDKl),主要通过与cyclinE/CDK2复合物结合而抑
7、制其活性,阻止细胞进入S期,使细胞停滞于G1期,如二者失调将导致细胞增殖和恶变。此外,p27尚有促进细胞分化，诱导细胞凋亡等多种生物学作用［4-5］。研究资料表明，很多人类原发肿瘤均发现抑癌基因CyclinE和ｐ27的异常表达，它们的异常表达可导致细胞异常增殖，从而促进肿瘤的发生和发展。本组实验结果显示，ｐ27低表达和CyclinE过表达的癌细胞增殖活跃。ｐ27低表达和CyclinE过表达呈明显负相关。提示ｐ27低表达和CyclinE过表达对细胞增殖有促进作用，细胞周期调控因子ｐ27的缺失和CyclinE过表达与卵巢肿瘤的发生发展明显相关。Cycli
8、nE的高表达和p27的缺失或低表达与卵巢肿瘤的发生、发展及恶性程度相关,联合两指标检测有可能为判定卵巢癌的恶
