云南昭通3种天麻对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.pdf

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1、62云南中医中药杂志2013年第34卷第1O期云南昭通3种天麻对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用韩春妮，林青，何芳雁，李艳，段小花△(云南中医学院，云南昆明650000)摘要：目的比较云南昭通3种天麻对小鼠脑缺血再灌1．4仪器JP一1／2型智能恒温控制仪，成都泰盟软件有限注损伤的保护作用。方法采用双侧颈动脉总结扎法复制小公司；IH2—300C型恒温培养摇床，上海一恒科学仪器有限公鼠脑缺血再灌注损伤模型，观察3种天麻对小鼠脑梗死率以司；InfiniteM200PRO型酶标仪，瑞士Tecan公司；LG10—及S0D活性和MDA含量的影响。结果与模型组比较，32．4A型离心机

2、，昆明安普科技有限公司。种天麻均能减少小鼠的脑梗死率，提高SOD活性和降低1．5方法MDA含量，但各天麻组间比较，无统计学意义。结论3种1．5．1动物分组及给药取昆明种小鼠50只，适应性饲养天麻均能明显改善缺血再灌注后小鼠的脑损伤程度，但3种3d，于实验前一天按体重随机分为假手术组、模型组、乌天麻天麻间的作用无统计学意义。组、黄天麻组、绿天麻组。各组均于手术前10d每日按2Og／关键词：天麻；脑缺血再灌注；SOD；MDA生药灌胃给药，灌胃体积为0．2mL／10g，假手术组与模型中图分类号：R285．6文献标志码：A组给予蒸馏水。文章编号：lO07—2349(2013)

3、10一OO62一O31．5．2实验动物模型复制[7-10末次给药30rain后，用1O水合氯醛0．03mL／10g麻醉小鼠，5min后分离双侧颈天麻(GastrodiaelataB1．)是我国的名贵中药，临床多用总动脉，与迷走神经分离，用静脉夹夹闭双侧颈总动脉以阻断于头痛眩晕、肢体麻木、&Jk惊风、癫痫、抽搐、破伤风等症。血流，1h后再松开以恢复血流，缝合伤口，置于室内再灌注云南昭通是公认的天麻道地药材产地，天麻原植物种内有多24h。假手术组小鼠相同方法手术，但不作血管夹闭。手术个变型，其中乌天麻(GastrodiaelataB1．f．glauca)、黄天麻过程中小鼠

4、放在铺有手术垫的恒温垫上以保持体温。(Gastrodiaelata131．f．flavida)、绿天麻(Gastrodiaelata1．5．33种天麻对缺血再灌注损伤小鼠脑梗死率以及SODB1．f．viridis)均有药用价值『】]。临床研究表明天麻具有抗缺活性和MDA含量的影响小鼠再灌注24h后，眼球取血，分血性脑损伤的作用l_2；本实验室前期研究发现天麻提取物离血清，将血清置于一40~C冰箱保存备用。小鼠眼球取血后有抗脑缺血再灌注损伤的作用旧，但至今未见天麻各变型之立即处死，取出脑，去除嗅球，立即放入一20~C冰箱，15min后间药效比较的研究报道，为此，本研究以

5、小鼠脑缺血再灌注损取出。由前向后做连续冠状切片，共4片。将脑切片置入伤为模型，比较云南昭通乌、黄、绿3种天麻的作用及其特点，0．1Trc溶液中，后放入恒温振荡器中，37~C避光染色为云南昭通天麻的开发利用提供科学依据。30rain。将脑切片取出后放人1O甲醛中固定12h，取出脑1材料与方法片，数码相机拍照，用MoticImagesPlus2．0显微图象分析系1．1实验药材乌天麻、黄天麻、绿天麻干品，均购于昭通天统计算梗死面积。因为脑水肿对其梗塞体积有影响，故采用麻研究所，经昭通天麻研究所陈顺芳老师鉴定。天麻原药材公式对其修正。具体公式如下：经95乙醇回流提取得浸膏，一

6、4O℃保存备用。脑梗塞灶体积(rnrn3)一总梗塞面积×脑片厚1．2动物昆明种小鼠，雄性，体重18~22g，由四jil省医学度(1．5mm)科学院实验动物研究所提供，合格证号：SCXK(；JI)2008—24，水肿修正后的脑梗塞灶体积(mrn3)一梗塞体积×对侧半生产批号：000712。球体积／同侧半球体积1．3试剂TTC(2，3，5一triphenyltetrazoliumchloride)，上梗塞率()一水肿修正后的脑梗塞灶体积／双侧大脑半海惠世生化试剂有限公司，批号：120808；SOD试剂盒，南京建球体积×100。成生物工程研究所，批号：20121011；MD

7、A试剂盒，南京建成按SOD和MDA试剂盒要求检测各组小鼠血清SOD活生物工程研究所，批号：20121009；GSH—PX试剂盒，南京建性和MDA含量。成生物工程研究所，批号：20121009。1．6统计学方法实验所得数据以表示，采用单因素方差分*基金项目：国家自然科学基金(NO：81160514)；云南省科技计划项目(NO：2010CA3022)作者简介：韩春妮(1989．9～)，云南弥勒人，研究方向：中药药理研究与应用，E-mail：376032924@qq．corn△通信作者：段小花，E-mail：1047896527@qq．com64云南中医中